大麦根提取磷脂酶影响因素的研究.pdfVIP

第 35卷 第 6期 根飧钟技占红 VoI．35。No．6 2010年 11月 Nov．201O 大麦根提取磷脂酶影响因素的研究 许浮萍 ，袁 超 ，栾 霞。，杨树明4 (1．哈尔滨学院 生命科学与化学学院，黑龙江 哈尔滨 150080；2．东方集团粮油食品工业公司， 黑龙江 哈尔滨 150000；3．国家粮食局科学研究院，北京 100019；4．国贸工程设计院，北京 100019) [摘要]研究用大麦根作为原料提取磷脂酶的方法。用罗维朋 比色分析结合酸碱滴定法确定 了从大 麦根 中提取磷脂酶的活力测定方法。用单 因素实验确定 了提取磷脂酶的影响因素、正交试验确定最佳提 取条件。得出提取磷脂酶的最佳条件：在0-3otolNaC1缓冲溶液中，料液比为 1：6、pH值为5．8、提取温度 30℃、提取时间4h时酶活最大。 [关键词]大麦根；磷脂酶；提取；影响因素 中国的磷脂资源丰富，随着油脂加工业的迅猛发展 ， 磷脂酶建立理论依据。 磷脂的产量也 日益增加 。虽然磷脂是极宝贵的天然生物 l 仪器与材料 乳化剂 ，但因其结构中有 2个亲油基 1个亲水基 ，致使它 的亲油能力更强，使用时乳化效果受影响。酶改性磷脂时 1．1 仪器 使用的磷脂酶 A1、A2等都是国外购置 ，价格昂贵。因 DS一1高速组织捣碎机 ，上海 比朗仪器公司 ；GL21M 酶的专一特性 ．同属磷脂酶，但提取原料不同的磷脂酶对 高速冷冻离心机 ，湖南凯达科学仪器有限公司 ；AD204一 不同底物的反应条件也有变化 ，用国外购置的磷脂酶很 N型 电子分析天平 ，上海精密科学有 限公 司；HWS24恒 难实现国内磷脂资源的工业化大生产 。选择一种价格低 温水浴锅 ，上海跃进医疗器械厂 ；搅拌器 ，中国上海仪器 廉 、变废为宝的材料作为工业化提取磷脂酶的原料 ，用 国 厂 ；电冰箱 ，海尔 ；PYX—DHS一4050PS隔水式 电热恒 温 产磷脂酶强化磷脂的乳化性 ，扩大磷脂在食品、医药等领 箱 ，中国上海仪器厂 ；80目筛 ；LGJ一18C普通型冷冻干 域的应用范围，增强其使用效果 ，是推进中国油脂精深加 躁机 。 工和油料综合利用的关键。 1．2 材料 国内在磷脂酶对磷脂乳化性 的影响方面有研究 。但 大麦根 ，哈尔滨啤酒厂；质量分数 90％粉状大豆磷脂 ， 在磷脂酶的提取方面研究报道较少。对磷脂 酶活力 的测 九三集 团惠康食 品公司 ；NaC1、NaOH、NazHPO、NaH2PO 定方法还存在着选择的底 物成分 复杂 ]、测定活力误差 均为分析纯 ；酚酞试剂 ；纯水 (自制 )。 大等问题 。大麦根中含有丰富的磷脂酶 ]，本课题用哈 2 实验方法 尔滨啤酒厂生产啤酒的废料大麦根作为原料，进行提取 、 分离和纯化磷脂酶的研究。大麦根 因其量大易得 ，在寻找 2．1 酶活力的测定原理 工业化生产磷脂酶原料的同时又实现了分离大麦根粗纤 卵磷脂和脑磷脂的混合物为粉状磷脂 ，它们 的 1、2、 维，进一步综合利用大麦根的过程。本文采用纯大豆粉状 3、4位酯键可以分别被磷脂酶A1、A2、C、D所打断。大麦 卵磷脂作底物 ，用罗维朋 比色配合酸碱滴定法确定 了磷 根中提取 的磷脂酶A1、A2。它断裂 Sn一1或Sn一2位酯键 脂酶活力测定方法 ，解决了用磷脂作底物终点不好判断、 生成脂肪酸和溶血磷脂 。用过量的无油磷脂作底物与酶 酶活力测定不准 的问题。用单因素实验研究 了从大麦根 液作用 ，生成 的