产絮凝剂复合菌群的培养基及培养条件优化.pdfVIP

第 45卷第 3期 华 中师 范大学学报 (自然科学版 ) Vo1．45 NO．3 2O11年 9月 J()URNAIOF HUAZHONG NORMAIUNIVERSITY(Nat．Sci．) Sept．201l 文章编号 ：1000—1190(2011)03—045006 产絮凝剂复合菌群的培养基及培养条件优化 苏晓梅 ，张慧芳 ，丁林 贤 ，申秀英 ，横 田明 (1．浙江师范大学 生化学院，浙江 金华 321004；2．浙江师范大学 地理与环境科学学院，浙江 金华 321004； 3．浙江科技学院 生物与化学工程学院，杭州 310023； 4．日本东京大学 分子细胞生物学研 究所 ，东京 113—0032) 摘 要 ：以利用复活促进 因子 (Rpf)从土壤和污水处理系统 中分离得到 的菌种作为筛选 絮凝剂产 生菌 的菌源 ，构建 出产絮凝剂 的复合菌群 M3和 M7．通过单 因素实验 ，以絮凝率 (FE)和菌体生长 (OD )为评价指标 ，对培养基 的组成及培养条件进行优化研究．结果表 明：该复合菌群 M3和 M7 在组分为淀粉 1．5 ，(NH )SO 0．3 ，FeC10．1 ，pH 7．0的发酵培养基上 ，经预发酵 ，以复配 比(M3：M7)为 0．6：0．4，6 (V／V)的总接种量 ，28℃，160r／min发酵培养 72h后 ，其产生 的高 效絮凝剂对高岭土悬浊液的絮凝率达 96．27 ． 关键词 ：微生物絮凝剂 ；复合菌群 ；复活促进 因子 ；培养基 ；培养条件 中图分类号 ：Q939．9 文献标识码 ：A 微生物絮凝剂 (MicrobialFlocculants，简称 凝性能 (絮凝率50Vo)的菌株 ，并利用有效生物技 MBF)是利用生物技术 ，从细菌 、真菌等微生物或 术原理 ，构建 出产 高效絮凝剂的复合菌群 ：节杆菌 其分泌物 中提取的一类具有 良好絮凝沉降性能的 属 (Arthrobacter)M3和金黄杆 菌属 (Chryseobac— 物质 ，其主要成分是多糖、蛋白质、糖蛋 白、纤维素 、 terium )M7．本文对此复合菌群的培养基及培养条 核酸等大分子物质_] ，它作为一种 “绿色”水处理 件进行优化研究 ，以提高絮凝剂的产量． 剂 ，具有安全 、高效、无毒、可生物降解、无二次污染 1 实验部分 等优点 ，从而受到广泛关注． 目前 ，主要采用纯培养技术对絮凝剂产生菌进 1．1 主要试剂与仪器 行分离筛选．而利用常规的分离技术仅能对 自然界 葡萄糖 、半乳糖 、果糖 、蔗糖 、麦芽糖、淀粉 、氯 中10 的微生物进行分离鉴定 ，尚有 90 以上分 化铵、硫酸铵、硝酸钠 、酵母膏、尿素、蛋 白胨 、KC1、 布于 土壤 。、活 性 污泥 、海水 j、湖水 [引、沉 淀 MgC12、CuC12、FeC12、A1C13、NaC1、高岭土 、CaC12、 物 【等 中的复杂微生物 ，因处于 “活的非可培养状 HC1、NaOH，所用试剂中除高岭土为化学纯 ，其余 态l71](VBNC，viablebutn0nculturab1e)”而难 以分 均为分析纯． 离培养．凶此 ，利用传统的分离培养技术 ，直接限制 PHX智能型生化培养箱、MIS一3750高压蒸 了人们对微生物的认识 ，并导致了大量的微生物资 汽灭菌锅、ZHWY—IOOC恒 温培养 振荡器、DHG一 源 尚不能被开发利用．利用复活促进 因子_8(Rpf， 9070A 电热鼓风干燥箱 、QT一2漩涡混合器 、BBT2一 resuscitationpromotingfactor)不但能使休眠的微 MIKRO22R台式高速冷冻离心机 生物复活 ，还可 以刺激正 常菌