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枉扬缘 2011．37(5)：124—128 PlantProtection
进境番茄种子中番茄花叶病毒的检测与鉴定
廖富荣 ， 郭木金 ， 林石明 ， 陈红运 ，
陈 青 ， 黄蓬英 ， 吴 媛 ， 谢惠明
(1_厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心 ，厦门 361026；2．福建农林大学，福州 350002)
摘要 利用双抗夹心一酶联免疫吸附试验 (DAEIISA)和反转录一聚合酶链式反应 (Rrr_PCR)方法对来 自韩国的番
茄种子进行种传病毒检测。结果表明，在该批番茄种子中检测到番茄花叶病毒 (ToMV)和烟草花叶病毒 (TMV)。
PCR产物测序结果表明，ToMV特异引物 (ToA／ToB)与TMV特异引物(TA／TB)扩增的片段均为ToMV的外壳
蛋 白(CP)基 因及 3非编码 区(3 UTR)，该片段与其他 ToMV分离物的核苷酸序列相似性为 98．2 ～99．9 。本
研究利用重新设计合成TMV和ToMV特异引物对该批种子进行RT-PCR检测，仅 ToMV特异性引物 (ToMfl／
ToMr1)扩增到670bp的预期片段，TMV特异引物 (TMfl／TMr1)则未出现特异性扩增，表明重新设计的引物可准
确 区分 ToMV和 TMV。以上结果证 实该批番茄种子仅携带 ToMV。
关键词 番茄种子； 双抗夹心一酶联免疫吸附试验； 反转录一聚合酶链式反应； 番茄花叶病毒； 烟草花叶病
毒 ； 种子传播
中图分类号： S436．412．11 文献标识码 ： A DOI： i0．3969／j．issru0529—1542．201l_05．023
DetectionandidentificationoftheTomatomosaicvirusinimportedtomatoseeds
LiaoFurong， GuoMujin。， LinShiming。 ChenHongyun，
ChenQing， HuangPengying， WuYuan ， XieHuiming
(1．CenterofInspectionQuarantineTechnology，XiamenBureauofEntry-ExitInspectionanduQarantine，
Xiamen 361026，China； 2．FujianAgriculturaland ForestryUniversity，Fuzhou 350002，China )
Abstract ThetomatoLycopersiconesculentum seedsimportedfrom SouthKoreaweredetectedwithDAS—ELISA
andRT—PCR methods．TheresultsshowedthatboththeTobaCCOmosaicvirus(TMV)andtheTomatomosaicvirus
(ToMV)werefoundintheseedlots．Sequencedeterminationprovedthatthefragment(703bp)withToMV—spe—
cificprimers(ToA／ToB)andthefragment(698bp)withTMV-specificprimerstr、 1TB)werecomposedofcoat
proteingeneand3-UTR ofToMV ，sharingidentitiesof98 2％--99．9％ withotherToMV isolatesatnucleotide
．
sequencelevel，whichindicatedthatthepreviouslypublishedprimerpairTA／TBwasnotsuitablefordiagno
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