尾加压素Ⅱ对心肌成纤维细胞表型转换的影响.pdfVIP

医药导报 2011年 l0月第 30卷第 10期 ·1275· 尾加压素 Ⅱ对心肌成纤维细胞表型转换的影响 邵志凌 ，何学心 ，向谨逸 (1．武汉铁路局社会保险管理处 ，武汉 430071；2．华中科技大学 同济医学院药学院，武汉 430030；3．华 中科技 大学同济医学院分子生物学系，武汉 430030) [摘 要] 目的 探讨尾加压素 Ⅱ对心肌成纤维细胞表型转换的影响。方法 培养 1d龄乳 鼠心肌成纤维细胞， 用酶联免疫吸附测定(enzyme—linkedimmunosorbentassay，ELISA)法检测细胞上清液中I型胶原含量，免疫荧光法及免疫 印迹法测定 仅一平滑肌肌动 蛋 白 (．smoothmuscleactin，0一【SMA)表达，免疫 印迹法检测细胞外调节蛋 白激酶 (extracellularregulatedproteinkinases，ERK)磷酸化；并观察ERK通路阻断药PlY)8059对尾加压素 Ⅱ促进心肌成纤维细胞 表型转换的影响。结果 尾加压素 Ⅱ刺激后，心肌成纤维细胞上清液 中I型胶原含量显著提高，胞内 —SMA表达明显 增高浓集、ERK磷酸化显著提高。给予PD98059后，—SMA表达明显下调。结论 尾加压素 Ⅱ可以诱导体外培养的心 肌成纤维细胞表型转换 ，机制与上调ERK通路有关。 [关键词] 尾加压素 1I；心肌成纤维细胞；表型转换；细胞外信号调节激酶 [中图分类号] R285．6 [文献标识码] A [文章编号] 1004—0781(2011)10—1275—04 EffectsofUrotensin ⅡonPhenotypicTransitionofCardiacFibroblasts SHA0Zhi—ling。HEXue．xin，XIANG Jin—yi(1．DepartmentofSocialInsuranceManagement，Railroad BureauofWuhan，Wuhan430071，China；2．SchoolofPharmacy，TongiiMedicalCollege，HuazhongUniversity ofScienceandTechnology，Wuhan430030，China；3．DepartmentofMolecularBiology，TongfiMedicalCollege， HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China) ABSTRACT Objective ToobserveeffectsofUrotensin Ⅱ (U Ⅱ)onphenotypictransitionofcardiacfibroblasts． Methods Inthepfima~ cultureofneonatalratcardiacfibroblasts(CFs)，asindexesofphenotypictransition，typeIcollagen wasassessedbyELISA ． ．SMA expression wereassessedby immunoblottingandimmunocytochemistry：ERK phosphorylation wasdeterminedbyimmunoblotting．Moreover，weevaluatedtheeffectofERKinhibitorPD98059onthepromotionofU IIinCFs phenotypictransition． Results U ⅡcanenhancethetypeIcollagenlevel，Ot—SMAandERKphosphorylation．AfterPD98059 treatment．0一【SMA expressionwasobviouslydepressed． Conclusion Urotensin IIcaninducephenotypictransitionofcardiac fibroblasts，themechanismsareassociatedwithenhancingERK