精子孵育时间及培养液成分对小鼠体外受精和胚胎发育的影响.pdfVIP

苏州大学学报(医学版)2009；29(4) 647 精子孵育时间及培养液成分对小鼠体外受精和胚胎发育 的影响 华月琴，陈瑞华，吴志南，沈宗姬 f苏州大学附属第一医院 生殖中心，江苏苏州 215006) 摘要 ：目的 探讨精子孵育时间及培养液成分对小 鼠体外受精和胚胎发育的影响，为人类辅助生殖技术完善质 量控制体系创建可靠 的平 台。方法 将精子获能时间分为 3组，分别为 0．5、l和 2h，用 HTF+10％SSS和HTF+10％ FCS两种获能受精液 ，ICR雄 鼠附睾尾的精子与成熟卵母细胞进行体外受精 (1VF)。受精卵分别用 IVC—ONE+10％ SSS、IVC—ONE+10％FCS、HTF+lO％FCS和 HTF+10％SSS4种培养液对体外受精胚胎进行培养 。结果 结果获能时 间为 0．5h时，卵母细胞的受精率显著高于其他组，差异有高度统计学意义(P0．O1)；获能时间若超过 1h，受精率明显 下降。胚胎用 IVC—ONE+10％FCS培养液进行培养时囊胚率和囊胚孵 出率 (89％和40％)显著高于 IVC—ONE+IO％SSS f51％和 29％)、HTF+IO％FCS(11％和 2％)和 HTF+IO％SSS(11％和0％)，差异有高度统计学意义(P0．01)。结论 小鼠 体外受精时，宜选用HTF受精液，并获能0．5h．，J、鼠体外受精卵进行培养，以含 10％FCS的IVC+ONE为胚胎培养液， 可获得较高的囊胚率 ，葡萄糖并不是小鼠胚胎形成囊胚所必需的；在含磷酸盐 的培养液 中EDTA不能有效克服 ICR2一 cell的体外发育阻滞现象。 关键词 ：精子孵育时间；培养液 ；体外受精 ；小 鼠胚胎 中图分类号 ：R321．1；R333 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673—0399(2009)04—0647—03 EffectofSperm CapacitationTimeandCultureM edium Components oninvitroFertilizationandEmbryoDevelopmentofM ice HUAYue—qin,CHENRui—hua, Zhi—nogt,SHENZong-ji (CenterofAssistedReproduction，theFirstHospitalAffiliatedtoSoochowUniversity，JiangsuSuzhou 215006，China) Abstract：0bjective Theexperimentswerecarriedouttoexploretheeffectofspermcapacitation timeandculturemediumcomponentsoninvitrofertilization(IVF)andculture(IVC)ofearlymiceem— bryosinvitro，andtodevelopanimprovedearlyembryosculturesystem formice．M ethods Sperm ca— pacitationtimewasdividedintothreegroups，0．5h(group I)，lh(group1／)and2h(groupllI)．Spermde— rivedfrom epididymaltailwereaddedtomatureoocytesforIVF indifferentculturemedium i．e．HTF+ 10％SSSandHTF +10％FCS．Theembryoswerecultured inIVC—ONE+10％SSS，IVC—ONE+10％FCS， HTF+10％FCSandHTF+10％SSS．Results TheIVFrateingroup 1wassignificantlyhighert