人乳腺癌微环境中癌相关成纤维细胞的生物学特征.pdfVIP

肿瘤2013 年10 月第33 卷第10 期　TUM OR Vol. 33, October 2013　　 855 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.10.002 Copyright© 2013 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 人乳腺癌微环境中癌相关成纤维细胞的生物学特征 1 2 1 3 1 1 1 彭琼乐，罗浩军 ，孙　艳 ，韩明利 ，王黎阳，赵浏阳，柳满然 1. 重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆　4000 16 ；2 . 重庆医科大学附属第二医院三腺外科， 重庆　400016 ；3. 重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科，重庆　400016 [摘要]　目的：研究人乳腺癌微环境中癌相关成纤维细胞 （carcinoma-associated fibroblasts ，CAFs ）的增殖、黏附、 α 迁移、侵袭和凝胶收缩能力。方法：首先通过蛋白质印迹法检测细胞中纤黏蛋白 （fibronectin ，FN ）、 - 平滑肌肌 α 动蛋白 （alpha-smooth-muscle actin ， -SMA ）和成纤维细胞活化蛋白 （fibroblast activation protein ，FAP ）的表达 来鉴别验证原代分离培养的CAFs 与正常成纤维细胞 （normal fibroblasts ，NFs ）。然后采用罗氏x Cellingence 活细 胞分析系统、细胞计数法和CCK-8 （cell counting kit-8 ）法比较CAFs 与NFs 的增殖差异。再通过细胞黏附实验、 罗氏x Cellingence 分析系统、Transwell 小室侵袭实验和凝胶收缩实验分别比较CAFs 与NFs 细胞的黏附、迁移、 侵袭和收缩的能力。结果：原代分离培养的人乳腺癌CAFs 细胞和NFs 细胞均生长状态良好，增殖活跃，生长曲 线的线型及趋势均符合细胞生长特点，但CAFs 细胞的增殖能力明显高于NFs 细胞。与NFs 细胞相比，CAFs 细 胞的黏附、迁移、侵袭和收缩能力均明显增强。结论：人乳腺癌微环境中的CAFs 细胞与NFs 细胞的增殖与迁移 存在明显差异，与NFs 细胞相比，CAFs 细胞具有较强的增殖、黏附、迁移、侵袭和收缩能力。 [关键词]　乳腺癌；成纤维细胞，肿瘤相关；肿瘤形成过程；细胞增殖；细胞黏附；肿瘤侵润；细胞收缩 [中图分类号]　R730.231 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2013) 10-0855-07 Biological characteristics of carcinoma-associated fibroblasts in human breast cancer microenvironment 1 2 1 3 1 1 1 PENG Qiong-le , LUO Hao-jun , SUN Yan , HAN Ming-li , WANG Li-yang , ZHAO Liu-yang , LIU Man-ran 1. Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics, Chinese Ministry of Education, Chongqing Medical University, Chongq