柴胡对肝硬化大鼠α-肌动蛋白及转化生长因子β1表达的影响.pdfVIP

陕西中医 2011年第 32卷第 1O期 1423 柴胡对肝硬化大鼠 一肌动蛋 白及转化生长 因子 』31表达 的影响 谢燕华 于 泳△ 陈 捷 陕西省 中医医院肿瘤科 (西安 710002) 摘 要 目的：本实验通过观察柴胡不同剂量对肝硬化形成过程 中肝组织转化生长因子 p1(TGF— 1)：a一肌动蛋白(a—SMA)的表达影响效果，探讨柴胡治疗肝硬化的药效学差异 ，为临床用 药提供动物实验依据 。方法 ：以复合造膜法复制实验性肝硬化大 鼠动物模 型共 8周 。成膜 大鼠随机分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组 。实验结束 时，做肝组织 HE 染色、 Masson染色。检测肝组织免疫组织化学TGF一』31、—SMA 的表达。结论 ：柴胡可有效抑 制肝纤维化，下调细胞因子a—SMA、TGF一91的表达，其 中高剂量效果显著 ，并可以改善肝 硬化 以及 纤维组织增生 、炎性细胞浸润程度 。 主题词 柴胡 ／药理 学 肝硬化 ／中医药疗法 转化生长 因子 j3 a肌动蛋 白类 【中图分类号】 R575．2 【文献标识码】 A 【文章编号】 1000—7369(2011)10—1423—02 柴胡作为我国传统中药，具有疏散、退热、舒肝生阳的功 SABC免疫组化染色试剂盒使用说 明书，根据 Macpherson评 效，柴胡具有抗炎、镇痛、保肝等多方面药理作用 ，本实验观察 分公式计算显色评分 。在细胞 内有棕黄色染色为阳性染色者 ， 柴胡对肝硬化大 鼠肝组织免疫组织化学TGF一81、a—SMA 的表 根据细胞浆 的染色程度 (I)以及染色细胞百分率评分指数 (PI) 达 的影响，对其抗肝硬化的作用机制做初步探讨 。 计算 。I为染色强度评分 ，Pi为标本 的阳性细胞百分率评分 。在 1 材料与方法 1．1 试验药物 柴胡 ：伞形科北柴胡 观察标本 5个有代表性的视野后 ，分析染色强度 ，并在高倍镜 Bupleurum chinenseDC 的干燥根 ；柴胡药材取 10g、20g、30g 下计数 100个细胞的阳性细胞数 ，计算阳性细胞百分率评分指 经 自来水浸泡 40min，第 1遍煎煮时加 7倍水，第 2遍加 5倍 数 (Pi)；染色强度评分指数(I)可分为基本不着色为 0分，着色 水 。严格控制煎煮时间，沸腾后 ，用控温 电炉保持微沸 30min。 淡者为 1分，着色适 中者为 2分，明显着色者为 3分，强着色者 合并 2次煎液 ，脱脂棉过滤 ，9o~c水浴浓缩至 1000g ·L。浓度。 为 4分，着色细胞计数细胞百分率 (pi)评分 0～9％为 0分，1O 冷藏保存 。 ～39 为 1分 ，40～69 为 2分 ，7O～79 为 3分 ，8O～89％为 1．2 动物 健康清洁级 8周龄 SpragueDawley大 鼠55 4分 ，90～100 为 5分 ，分别对每个标本进行评分 。 只，体重 180g~200g，购 自第四军医大学实验动物 中心 1．6 统计学处理 数据管理采用 MicrosoftAccess2007。 1．3 试剂 ①造模用试剂 四氯化碳分析纯 购 白天津市 统计分析采用 SPSSI3．1统计分析软件包 。行单因素方差分析 纵横兴工贸有限公司化工试剂分公司。橄榄油分析纯 购 自国 (one—wayANOVA)，SNK(q检验)进行两两 比较 ，数据 皆以(__--4- 药集 团化学试剂有 限公司。50 粮食酒 由北京二锅头酒厂生 SE)表示 ，方差不齐时，数据经平方根转换，P0．05为差异显 产 。结晶胆固醇 由上海山浦化工有限公司生产。②检测指标 著性 。 用试 剂 TGF—B1一抗 购 自博奥森生物工程有 限公 司 。a—SMA 2 结 果 2．1肝组织 中a—SMA 的表 达 中药治疗组大 一 抗 购 自博奥森 生物 工程 有限公 司。