产纤维素酶海洋细菌的筛选和酶学性质的初步研究.pdfVIP

第24卷第4期 烟台大学学报 【自然科学与工程版) VoI．24No．4 2011年 lO月 JournalofYantaiUniversity(NaturalScienceandEngineeringEdition) Oet．2011 文章编号：1004-8820(2011)04--0304--05 产纤维素酶海洋细菌的筛选和酶学性质的初步研究 唐志红 ，张 振 ，张聪芝 ，温少红 ，‘秦 松 (1．烟台大学海洋学院，山东 烟台264005；2．中国科学院烟台海岸带研究所，山东 烟台264003) 摘要：从病烂的海洋植物 中分离到一株高产纤维素酶的菌株 TX-12，革兰氏阴性，经鉴定 为噬纤维茵属(CeUulophagasp．)中的一个种．该菌株在温度25℃、培养基起始pH8．0条 件下培养56h产生碱性纤维素酶活力高达354．8U／mL．酶学性质初步研究显示，TX一12 产生的纤维素酶最适反应pH值为8．O，最适反应温度为60℃，在0—100cI=酶活均能保 持最高酶活的70％以上．酶液在 100℃时仍具有较高的稳定性．Fe 、Cu 、Mn¨对酶反 应有一定促进作用，Hg2和Pbn对酶反应有强烈的抑制作用． 关键词：纤维素酶；海洋细茵；筛选；酶学性质 中图分类号：TQ920．1 文献标志码 ：A 纤维素酶 (CMCase)是降解纤维素生成葡萄 均有活性，并且属于胞外 ．本工作从病烂的 糖或纤维寡糖的一组酶的总称，它不是单种酶，而 海洋植物中分离到一株产新型纤维素酶的Cellu— 是起协同作用的多种酶系¨J，在生产生活中广泛 lophagasp．TX-12，并对该菌株生长和产酶特性 应用于食品、酿酒、造纸、饲料、纺织等行业等各个 以及所产纤维素酶的酶学性质进行了初步研究 ， 领域 】，其应用前景十分广阔．一直以来，研究者 为其进一步的研究和应用奠定基础． 将分离纤维素降解菌的场所主要局限于陆地上， 使得纤维素酶的来源受到很大的限制．海洋生态 1 材料与方法 环境复杂，高盐度、低温及特殊的光照条件使海洋 1．1 材料与仪器 微生物极具多样性，近年来海洋微生物成为开发 菌株 TX一12是从烟台附近海区(月亮湾、栈 新型酶制剂的重要来源．新型海洋酶制剂研究不 桥等地)采集海带、裙带菜等植物样品中筛选得 但为生物起源及进化、微生物的分类、酶催化机制 到．初筛培养基：羧甲基纤维素钠 (CMC-Na)15 等基础研究提供新的依据，而且推动酶在工业中 g，酵母膏3．0g，(NH4)2SO42．0g，KH2PO41．0g， 的广泛应用-3J．目前虽然仅有少数学者对产纤 维素酶的海洋微生物进行了研究 ．oJ，但 已显示 MgSO4·7H200．5g，陈海水 1000mL，pH=7．5； 出海洋微生物在开发纤维素酶方面具有诱人的前 种子培养基 蛋 白胨 5g，酵母粉 1g，柠檬酸铁 0．01g，KC10．7 g，MgCI2。6H2O 4．6 g，MgSO4 ‘ 景．Larry等人获得了一株产纤维素酶的海洋细菌 Saccharophagusdegradans2—40，其独特之处在于 7H2O 6．3g，CaC12 ·2H2O 1．2g，NaHCO30．2 g， 其代谢作用的多样性 ，它能降解十几种来 自藻类、 蒸馏水 1000mL，pH=7．5；发酵培养基：成分同 陆地植物及无脊椎动物中的多糖类物质 j