豆粉基因组DNA不同提取方法的比较.pdfVIP

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中国震季c亟握 2011,27(23):119—122 ChineseA~riculturalScienceBulletin 豆粉基因组DNA不同提取方法的比较 徐伟丽 ,马 莺 ,杜 明。,汪家琦 ,李启明 (哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,哈尔滨 150090 新希望乳业控股有限公司技术中心,成都610023) 摘 要:以市售豆粉为材料,分别采用热解法、异丙醇沉淀法、CTAB法、SDS法、高盐低pH法等以及它们 的改良方法提取基因组DNA,并对提取的DNA进行光密度、琼脂糖凝胶电泳和PCR检测。结果表明除 改进高盐低pH法外,其他所有方法提取的基因组DNA均可满足PCR检测要求。同时,综合考虑基 因 组DNA的纯度和浓度 ,此研究认为豆粉基 因组DNA提取方法的优劣依次为:改进热解法、改进异丙醇 沉淀法、热解法、异丙醇沉淀法、高盐低pH法、改进CTAB法、CTAB法和改进SDS法。这几种豆粉基 因 组DNA提取方法都具有操作简单、耗时短、利于快速检测的优点。 关键词 :豆粉 ;基 因组DNA;提取 ;聚合酶链式反应 中图分类号:$565.1 文献标志码 :A 论文编号:2011-0159 ComparisonofDifferentExtractionMethodsofGenomicDNA from SoybeanPowder XuWeili,MaYing,DuMing,WangJiaqi,LiQiming (DepartmentofFoodScience,HarbinInstituteofTechnology,Harbin150090; TechniqueCenter,NewHopeDairyHoldingsCo.Ltd,Chengdu610023) Abstract:Inthepresentstudy,tofindoutthebettermethodsofsoybeanpowdergenomicDNA extractionfor themolecularmarkeranalysisofhighqualityandsufficientsamples,theextractionmethodofgenomicDNA from soybeanpowderpurchasedrfom marketwasoptimized.Thereare12methodsused in theextractionof DNA,inwhichpyrolysis,high-saltlow—pH,isopropylalcohol,CTAB,SDSorGuSCN,andtheirmodified methodswereinvolved.TheeffectsofdifferentmethodswerecompraedbydetectingtheDNA byoptical density,agarosegelelectrophoresisandpolymerasechainreaction(PCR).Resultsshowedthatthegenomic DNA extractedbyallmethodsexceptofrmodifiedHigh-saltlow-pH methodcouldbeusedinPCRreaction. Meanwhile,thebetterDNA concentration andpuritywillbegained bydifferentmethodsin theorderof modifiedpyrolysismethod,modified isopropylalcoholmethod,pyrolysismethod,isopropylalcoholmethod, High-saltlow-pH method,modifiedCTABmethod,CTABmethodandmodifiedSDSmethod.Thesemethods raesimplytooperate,fasttogainresul

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