改变食物硬度对大鼠生长期髁状突软骨中TIMP-3表达的影响.pdfVIP

. . 华 夏 医 学 第 卷第 期 . 年 月 改变食物硬度对大鼠生长期髁状突软骨中一 表达的影响① 李 煜③,黄慧萍,于大海③,李 晶,罗婷婷 广西医科大学附属口腔医院口腔领面外科,广西 南宁 摘要:目的:通过改变食物硬度造成大鼠生长早期颞下颌关节软骨的负荷改变,检测金属蛋白酶组织 抑制剂因子一 一 表达变化,探讨其在髁状突软骨发育中的意义。方法: 只 日龄 雌性大 鼠同时哺乳与喂食粉末样食物,第 天断奶,随机分为两组:对照组仍喂食粉末样食物,实验组改喂 同种成分的硬块状食物,食物改变后,在第 , , , 时每组各处死 只大鼠。半定量检 测 个时段两组间: 表达。结果:半定量分析表明,在开始实验后,整个髁状突软骨~ 在 软、硬食物组中的表达,在最初 时间上有统计学差异,软食物组的高于硬食物组.,而在 随后的时间点无明显差异。一 的表达在软 硬 食物组中 与 、 与 、与 的 时间点上均有统计学意义.。结论:改变食物负荷后,早期一 表达变化的时间和负荷依 赖性,提示负荷的改变引起一 在髁状突软骨生长发育过程中的变化是一种在生理范围内的,敏 感、暂时、适应性的改变。 关键词:金属蛋白酶抑制因子一 ;颞下颌关节;负荷 中图分类号: .; . 文献标识码: 文章编号:? ? 一 / , ?, ?,. , : : 一 .:?: ? ,; ? , 一.? ? , , , ? . ?? ? ?.:?一 ’ ’ ‘ ‘ ., ., ?,, 。 ① 基金项目:广西科学基金资助项目 桂科回 广西医科大学研究生学院口腔领面外科 级研究生。 ② 作者简介:季煜 一 ,女,河北昌黎人, ⑧ 通讯作者:于大海。第 期 华 夏 医 学 第 卷 , . : , 一 , . :一 ; ; ;颞下颌关节 , 是 分析检测。 下颌骨的一个重要生长区之一,新生的动物通过下颌 . 实验方法 骨髁状突软骨的骨化使下颌骨升支得以延伸,这个过 . . 髁突软骨中总提取及合成 采 程包括软骨基质中软骨细胞的分化、凋亡、降解,接着 用一步法提取髁突软骨中总, 血管侵入和松质骨的形成。其中负荷对于颞下颌关节 逆转录试剂盒提取 并将其保存于 一 ℃用于 髁状突的发育和改建具有重要的调节作用,而这一调 反应。 控作用主要是通过影响髁状突软骨内细胞的分化、成 . . 扩增 反应总体积为,其中 熟而形成的 。目前认为关节软骨细胞外基质的降解 一 引物:上游 ’一 首先是可聚蛋白聚糖的丧失,这个过程首先是由 一 ,下游一一 发动,然后基质金属蛋白酶 一 ,内参 ? :上游: , 参与引。而金属蛋白酶组 一 ,下游: 织抑制因子,一 。预期扩增片段为:一、内参 是很重要的调节因子,其中一 有,反应条件为预变性, ℃ , 对 一 最有效的抑制作用。有研究证明 退火温度分别为 ℃、 ℃, ℃,循环次数 在改变负荷后,一 在大鼠颞下颌关节发育及早 分别为 次、 次,最后 ‘ 延伸, ℃保存。 期时的表达变化可能是一种生理范围内的暂时的适 . . 产物的检测 扩增产物与应性的改变,提示它参与了生长早期软骨代谢,同时 上样缓冲液混合后上样,在 琼脂糖凝胶中电泳,紫 也表明机械性负荷是影响髁突生长的重要因素 。本 外凝胶成像系统上照相。用 凝 研究通过改变食物硬度及较长时间干预后,采用 胶成像分析系统测定每条扩增片段的光密度 半定量法检测一 的表达变化,进一步证明负荷 值,将每一种目的基因扩增片段光密度与内参照 与一 在颞下颌骨发育中的作用,及相互之间的 扩增片段光密度的比值 / 作为其 关系。 表达水平的半定量指标。 . 统计学处理 采用 . 统计学软件, 检验,. 为 材料与方法 差异有统计学意义。 . 动物及组织准备 选用 只 日龄的 雌性大鼠, 结果 因为大鼠在第 天时断奶,因此,从第 天时,在母 乳的同时,均喂食粉末样食物。到第 天早上 : , 一 半定量分析表明,在开始实验后整个髁 突软骨一 表达,软食组只有在最初的高于 随机分成两组,一组为实验组改喂坚硬的相同成分颗 硬食物组,.、.、第 天 粒样食物,另一组为对照组仍喂食软性食物。改变食 .、第 天 尸 .。详见图 、表 、图 。 物硬度后在第 、 、 、 每组分别处死 只 大鼠,仔细剔取髁突软骨,存放于一 ,用于 一?第 期 李 煜等:改变食物硬度对大鼠生长期髁状突软骨中一 表达的影响 第 卷 图 两组第时一 和 一肌动蛋白 不同循环的产物 皇实验组 讨论 一对照纰 下颌髁突软骨是颞下颌关节的重要组成部分,它 在决定下颌骨的生长速度、生长量和生长方向及下颌 骨