一步法RT—PCR检测大缸奶在BVDV清除计划中的应用.pdfVIP

· 4 · 卞圈町冲2·011·18科·技 一 步法 RT—PCR检测大缸奶在 BVDV清除计划中的应用 黄凯，邵晓磊，李锡智 (北京三元绿荷奶牛养殖中心，北京 100076) 中图分类号：$858．23 文献标识码 ：A 文章编号 ：1004—4264(2011)18—0004—04 摘要 ：本文利用一步法RT—PCR对28个牛场共计5O份大缸奶样进行了BVDV核酸检测。在与全群抗原检测 结果对比后发现，9个已知存有PI牛的泌乳牛群，其大缸奶核酸检测均为阳性，其余41个已知无PI牛的泌乳 牛群 ．除 1个因为存在急性感染牛造成阳性结果外，其余40个均为阴性。由此可见 ，本方法对与泌乳牛群 内是 否存在 PI牛可以做 出准确判断，其检测灵敏度和特异性均为 100％，阳性预测结果可信度为0．9(9／l0)，阴性预 测结果可信度为0．98(40／41)。此外．针对5O个大缸奶样进行的抗体检测表明，对于已感染牛场，泌乳牛群是否 存在 PI牛，抗体水平没有明显差异 (OD1．12_+0．12vsOD1．34_+0．23，P0．05)。实验室条件下，本试验使用的RT— PCR方法对于阳性乳的最低检出限为50 头，因此理论上 ，最多可从 1000份样品中检 出阳性乳成分 (总体积 为50mL)。综上可知 ，本试验确立的RT—PCR方法灵敏度高、特异性强，可对泌乳牛群是否存在PI牛进行准确 预测，相比大缸奶抗体检测更具实际指导意义，联合 ELISA—Ag使用时还可大幅度降低泌乳牛群 BVDV清除 计划的检测成本 ，因而值得推广使用。 关键词 ：RT—PCR；BVDV—Pl牛；大缸奶核酸检测 ；大缸奶抗体检测 ；BVDV清除计划 目前 BVDV(Bovineviraldiarrheavirus)已呈世 immunetolerance)及持续感染 (persistentlyinfected， 界流行趋势 ．其 已成为危害牛群健康 的重要病原之 PI)。PI牛作为该病毒的主要传播者可以通过体液 一 ， 胎儿遭到先天感染后会出现多种结局 。其中影 和直接接触终身传播该病毒 ，因此 ，识别清除PI牛 响最为深远的就是造成胎儿先天免疫耐受 (Innate 是 BVDV防控策 略的重要环节…。最早开始 实施 BVDV清除策略时，所有在群动物都将进行抗原检测 ， 收稿 日期 ：2011—03—28 作者简介 ：黄凯 (1984一)，男 ，北京市大兴区人 ，硕士 ，主要从事奶牛 然而随着选择性清除策略的提 出，后备牛血清检测 通讯作者． 堡登 相关研究 … ，． ．……．…… (spottest)以及大缸奶抗体检测(bulkmilkantibody ：李锡智 (1977一)，男 ，北京市大兴区人 ，农学学士 ，主要从 、 。 事奶牛营养及管理的相关研究。 test)逐渐得到使用 ，利用 以上两种方法 ，可对后备牛 SNPsofFASN GeneandtheirEffectsonFattyAcidsComposition inChineseHolstein HOUYu-jie，CHANGLing-ling，MA0Hai—yun，XULu，YANGZhang—ping，MAOYong-jiang (CollegeofAnimalScienceandTechnology，YangzhouUniversity，Yangzhou 225009) Abstract：Fattyacidsynthase(FASN)playsanveryimportantroleinfatsynthesisindairyCOW．ThepolymorphismsofFASNgene exon2，4，26and 34inChineseHolsteinpopulatio