外源性miR-34a抑制H1299细胞生长的机制研究.pdfVIP

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2017-09-13 发布于重庆
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外源性miR-34a抑制H1299细胞生长的机制研究.pdf

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网络出版时间：2013-04-24 11:06 网络出版地址：/kcms/detail/31.2035.Q1106.003.html 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2013, 35(5): http ://www.cj 外源性miR-34a抑制H1299细胞生长的机制研究 1 2 1 3 3* 段广新段卫明许雅香张燕娟周新文 1 2 3 (苏州大学医学部基础医学与生物科学学院; 苏州大学附属第一医院; 放射医学与防护学院, 苏州2 15123) p53 –/– 摘要将合成的miR-34a成熟序列转染的非小细胞肺癌H 1299细胞, 探究外源性的miR- p53 34a是否影响缺失细胞的生长、凋亡和衰老以及其作用机制。MTT检测细胞的生长与存活, 藻红B染色检测细胞的死亡, Annexin V/PI染色检测细胞凋亡, β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞的衰老, Western blot检测与细胞凋亡和周期相关的Bcl-2 、Puma 、Cdk4和E2F3蛋白的表达。结果显示, miR-34a转染组和阴性对照组相比, 存活率明显降低, 且48 h较24 h更显著, 24 h和48 h存活率分别为 79.94% 、64.83%; 细胞死亡和凋亡的分析结果表明, 外源性miR-34a可以促进细胞死亡和凋亡; 此外, 细胞还出现了明显的衰老, 并且检测到凋亡、衰老相关的Bcl-2 、Puma 、E2F3和Cdk4蛋白的表达 p53 下调。miR-34a可以下调下游相应靶蛋白的表达, 通过部分补救p53通路或p53非依赖途径促进细胞的凋亡、衰老并抑制细胞的增殖。关键词 miR-34a; 凋亡; 衰老; E2F3 Cell Growth Inhibition by Exogenous miR-34a in H1299 Cell 1 2 1 3 3* Duan Guangxin , Duan Weiming , Xu Yaxiang , Zhang Yanjuan , Zhou Xinwen 1 2 3 ( School of Biology and Basic Medical Science; The First Hospital Affiliated to Soochow University; School of Radiation Medicine and Protection, Medical Co