用高倍镜观察线粒体和叶绿体实验方案的改进.pdfVIP

· 54· 生物学教学2010年(第35卷)第12期 用高倍镜观察线粒体和叶绿体实验方案的改进 刘原平 王 亚 (西南大学生命科学学院 重庆 400715) 本实验的目的是使用高倍镜观察叶绿体、线粒体 (1)配制健那绿常有少部分颗粒难 以溶解，建议 的形态和分布，并让学生了解到所观察到的现象与科 加热至30～40℃后用滤纸过滤2—3遍。 学事实之间的差距 ，树立 良好科学态度。在实践中发 (2)用原方案中质量分数为 I％的健那绿染色之 现该实验的方案有以下可改进的地方： 后 ，发现细胞内染色过重 ，无法很好地将线粒体与细胞 1 叶绿体的观察 质基质区分开来。逐步稀释后发现以质量分数为0． 1．1 实验材料 本实验安排在第一学期的中期，而我 02％的健那绿染色8～10min后效果较好。 国地域广阔，致使部分地区秋季难以找到新鲜藓类、黑 (3)制作 口腔上皮细胞临时装片时，为避免 口腔 藻 ，因此菠菜、芦荟等是较好的实验材料。为让学生观 中的微生物食物残渣等干扰项，建议采用如下步骤：用 察到叶绿体更多的分布和形态，建议添加天门冬、皱叶 凉开水漱 口3～4次后 ，分两次用牙签宽头在 口腔黏膜 酸模、水绵等作为实验材料，这些材料在秋冬季节均比 同一位置稍用力刮取上皮细胞，将第二次刮得的黏液 较好找 。 状物质均匀涂于染液中。这是由于最表面的黏膜上皮 1．2 取材方法 根据不同材料，采用如下不同的方法： 细胞大都已衰老 ，代谢不旺盛 ，故线粒体少，而内层的 (1)水绵 ：用镊子取一丝水绵的丝状体，放入载玻 上皮细胞代谢较活跃。 片上的水滴中，盖片观察。 (4)为尽量保持细胞活性进行活体染色，建议染 (2)芦荟 ：纵剖芦荟 肉质叶，洗去凝胶状物质 ，用 色时将装片放在 37~C恒温水浴锅铁板上。染色期间 解剖针轻轻来回划动刮下叶肉细胞涂于载玻片上的水 要防止装片干燥，必要时可滴加染液。 滴中，盖片观察。 (5)染色后若不洗脱多余染液，细胞中会滞 留较 (3)天门冬 ：挤压叶状枝，挤出少许淡绿色液体于 多健那绿染液，影响观察。建议染色时间到后按如下 载玻片上的水滴中 j，多取几次可得较多细胞，甚至 方法洗脱 ：将载玻片平放在实验台上(防止因盖玻片滑 是单独的叶绿体，盖片观察。 动造成细胞折叠而影响观察)，在载玻片的一端逐滴滴 (4)菠菜、酸模皱叶：事先去除黄叶，洗净。在无直 加生理盐水，在另一端用吸水纸吸取液体 ，重复 2～3 射光和强光处晾晒，当菠菜叶稍微变软时(此时叶片失 次，即可洗去多余的染液。 去一部分水 ，下表皮与叶肉结合力较强、较紧密)，用镊 (6)观察线粒体时，应用油镜，否则无法很好地观 子贴近叶下表皮从叶中部向边缘撕揭，可得到连有一 察到实验结果。建议在实验中讲解油镜 的原理，示范 定量的叶肉细胞下的表皮 【。放入载玻片上的水滴 使用方法。 中，盖片观察。 需要注意是 ，此时观察到的蓝绿色颗粒不能确定 2 线粒体的观察 为线粒体，也可能是好氧细菌等，只能从形态上对线粒 线粒体的观察主要在以下方面改进： 体的形态分布有感性的认识。 4．3 合理安排 国外大多数 的 “BioBlltz”都是以24h