调控木薯淀粉合成的干涉载体构建及转化木薯的研究.pdfVIP

烈 币 ，rF： 孚 报 2U12，jl3(11)：1996-2001 ChineseJournalofTropicalCrops 调控木薯淀粉合成的干涉载 体构建及转化木薯的研究 崔丽丽 ，韦祖生 ，谢宝书 ，黄 强23 田益农 ， 黎 萍z3，李慧敏 3，黄惠芳 ，彭靖茹 ，侯学文 l华南农业大学生命科学学院分子植物生理研究室，广东广州 510642 2广西壮族 自治区木薯研究所 ．广西南宁 530001 3广西壮族 自治区亚热带作物研究所 ．广西南宁 530001 摘 要 为了调控木薯块根淀粉含量与组成．以甘薯块根特异表达 SporaminA启动子驱动构建了腺苷二磷酸葡 萄糖焦磷酸化酶AGPase小亚基 (ADP-glucosepyrophosphorylasesmallsubunit1，AGPaseSU1)、可溶性淀粉合成 酶 (solublestarchsvnthase1，SSS1)、颗粒性淀粉合成酶 (granule—boundstarchsynthase1，GBSS1)的干涉载体 ， 通过农杆菌介导法转化木薯 SC205的胚性愈伤，获得了转化再生株系。酶切鉴定及测序表明，构建的上述 3个 调控木薯块根淀粉合成的干涉载体构建正确 ．对获得的转化再生株系用潮霉素筛选及潮霉素抗性基因 日P 的引 物进行扩增 ．部分株系有阳性扩增条带 ．初步说明本研究获得 了以调控木薯块根淀粉含量与组成的转基 因木薯 SC205株系。 关键词 木薯 ；RNA干涉 ；腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 ；可溶性淀粉合成酶 ；颗粒性淀粉合成酶 中图分类号 Q78：$533 文献标识码 A The Construction ofRNA InterferenceVectors Regulating Cassava Starch Biosynthesisand theTransformation ofCassava CUILili，WEIZushengz，XIEBaoshu，HUANGQiang3，TIANYinon~’3， LIPing。3 LIHuimin ，HUANG Huifang ，PENG Jingru 3，HOU Xuewen 1LabofMolectd~PmntPhysiology，Collegeof Sciences，South—ChinaA uhurdUniversity，Gum~hou，G 如 510642，China 2GuangxiC∞s，nResearch Institute，Nanning,Guangxi53001，China 3 GuangxiSub—tropicCropsResearch Institute，Nanning,Guangxi53001，China Abstract In ordertoregulate thestarch contentand constitute ofcassava tuber，the RNAitransformation vectors ofADP-glucosepyrophosphorylasesmallsubunit1(AGPaseSU1)，solublestarchsynthase1(SSS1)andgranule— boundstarchsynthase1(GBSS1)wereconstructedunderthedrivingofsweetpotatotuberspecificexpression SporaminA promoter，andregeneration cassavaSC205plantswereproduced throughAgrobactenum-mediated infection ofSC205 embryoniccallus．Theabove 3 consturcted vectorswere confirmed by restriction enzyme