巨噬细胞移动抑制因子经Rho激酶途径促进人胚肺成纤维细胞表型转化.pdfVIP

· 1938 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(11)：1938—1942 [文章编号】 1000—4718(2012)l1—1938一o5 巨噬细胞移动抑制因子经 Rho激酶途径 促进人胚肺成纤维细胞表型转化 陈培芬 ， 邱智辉 ， 张香梅 ， 黎振兴 ， 罗雅玲 ， 赖文岩 ， 孙秀才 (深圳市第三人民医院 内二科，胃镜室，病理科，广东深圳518112；广州医学院附属第三医院呼吸科， 广东 广州510150；南方医科大学附属南方医院呼吸科 ，心内科实验室，广东 广州510515) [摘 要] 目的：观察重组巨噬细胞移动抑制因子(rMIF)对人胚肺成纤维细胞(MRC一5)表型转换的作用， 探讨哮喘气道重塑的发生机制。方法：不同浓度的rMIF(25—100 吕／L)分别作用于MRC一5细胞 24h或48h， RT—PCR法检测0【一平滑肌肌动蛋白(0【一SMA)mRNA表达，Westernblotting检测 a—SMA蛋 白合成 ；100 g／L rMIF刺激 MRC一5细胞48h，刺激前0．5h加入Rho拮抗剂Y27632，RT—PCR法检测 —SMAmRNA表达，West- emblotting法检测a—SMA表达；100 g／LrMIF分别刺激MRC一56h、12h、24h或48h，Westernblotting检测磷酸 化肌球蛋白磷酸酶 目标亚单位 1(P—MYP1)蛋白合成。结果：刺激 MRC一542 h，不同浓度的rMIF对 —SMA mRNA转录未见显著影响(P0．05)。刺激 MRC一5细胞48h，rMIF可呈剂量依赖地促进 口一SMAmRNA(r= 0．697，P0．01)和蛋白(r=0．957，P0．01)表达。Y27632预刺激后，显著抑制rMIF100 L促进 o【一SMAmR· NA和蛋 白表达的作用(均P0．01)。rMIF刺激6h后 ，P—MYPT1表达显著增加 (P0．01)，12h达到高峰(P 0．O1)，42h开始下降，但42h和48h其水平仍高于对照组(均P0．O1)。结论：rMIF通过 Rho信号通路刺激成 纤维细胞表型转化，可能在哮喘气道重塑的发病机制中发挥关键作用。 [关键词] 巨噬细胞移动抑制因子；成纤维细胞；肌成纤维细胞； 一平滑肌肌动蛋白；Rho相关激酶类 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2012．11．004 M acrophagemigration--inhibitoryfactorinducesmyofibroblasticpheno- typetransformationofhumanembryoniclungfibroblastsviaRho—ki- nase／nvitro CHENPei—fen，QIUZhi—hui，ZHANGXiang—mei，LIZhen—xing4，LUOYa— ling 。LAIWen—yan。．SUN Xiu—cal (SecondDepartmentofInternalMedicine，GastroscopeRoom，DepartmentofPathology，如 ThirdPeoplesHospitalof Shenzhen，Shenzhen518112，China；DepertmentofRespiratoryDiseases，theThirdAgUildHospitalofGuangzhouMedi— calColelge，Guangzhou510150，hCina；DepartmentofRespiratoryDiseases，。LaboratoryofCardiologyDepartment，Nan- ，口ngHospital，SouthernMedicalUnive~ity，Guangzhou510515，hCina．E—mail：luoyaling08@sohu．corn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheinfluenceandthemechanismo