拟南芥DWF4基因的内含子影响自身表达.pdfVIP

第 38卷第 6期 湖南农业大学学报 (自然科学版) v01．38 NO．6 2012年 12月 JournalofHunanAgriculturalUniversity (NaturalSciences) Dec．2012 D0I：10．3724／SEJ．1238．2012．00597 拟南芥DI41F4基因的内含子影响自身表达 彭志红 ，一，黄颖 ，袁利兵 ，任春梅 ， (1．湖南农业大学 生物科学技术学院，湖南 长沙 410128；2．作物基因工程湖南省重点实验室 ，湖南 长沙 410128) 摘 要：为了进一步确定DWF4基因的内含子是否影响自身表达，构建了35S启动子驱动的带内含子和不带内 含子的DWF4基因表达载体，分别转入拟南芥DWF4基因的弱突变体pscl。对T2代幼苗进行表型分析发现，转 入带内含子的DWF4基因的转基因株系TgD4能完全恢复突变体的表型，而转入不带内含子的DWF4基因的转基 因株系 TcD4只能部分恢复突变体的表型。RT—PCR分析显示 ，TgD4的DWF4表达水平明显增加，说明内含子 对DWF4基因的表达有增强作用。 关 键 词：拟南芥；DWF4基因；内含子；基因表达 中图分类号：Q786 文献标志码：A 文章编号：1007—1032(2012)06—0597—05 IntronsofDWF4geneinfluencegeneexpressioninArabidopsis PENG Zhi。hong ’，HUANGYing，YUAN Li—bing，REN Chun—mei， (1．CollegeofBioscienceandBiotechnology,HunanAgiculturalUniversity,Changsha410128．China；2．Crop Gene EngineeringKeyLaboratoryofHunanProvince，Changsha410128，China) Abstract：TobeRerunderstand theexpressionpaRemsofDWF4，expression plasmidswith35S CaMV constitutive promotercontainingDWF4genewithorwithoutitsownintronswereconstructedandtransformedrespectivelyintothe psclmutantdeficientinthebiosynthesisofbrassinosteroids(BRs)．Phenoytpicanalysisshowedthatthetransgeniclines TgD4withtheintronsofDWF4genecouldrescuethedefectofBR biosynthesisinpscltotally,whereashtetransgenic lines TcD4withouthte intronsofDWF4 genecould only rescuethedefectofBR biosynthesispartially．RT——PCR demonstrated thathte expression ofDWF4 in hte transgenic lines TgD4 wasobviously increased indicating hte expressionofDWF4genecouldbeenhancedbyitsownintrons． Keywords：Arabidopsis；DWF4；intron；geneexpression 芸薹素(brassinosteroids，BR)是2O世纪70年代 内含子是最常见的内含子l7】，在mRNA转录加工后， 发现的一类重要的植物激素L1J。芸薹素参与植物的细 内含子被切除掉，起初人们认为内含子没有功能。 胞伸长和分裂、输导组织分化、衰老、抗逆性以及