体内成骨过程中人脂肪基质细胞对新骨形成的促进作用.pdfVIP

北 京 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) · 916 · JOURNALOFPEKINGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES) Vo1．44 No．6 Dec．2012 · 论 著 · 体内成骨过程中人脂肪基质细胞对新骨形成的 促进作用 刘云松 ，吕珑薇h，周永胜 ，马桂娥 ，张 晓 ，范 聪 ，邵 校 (1．北京大学VI腔医学院 ·口腔医院修复科，北京 100081；2．中国医学科学院整形外科医院体型雕塑吸脂中心， 北京 100144) [摘 要]目的：探索以人脂肪基质细胞(humanadipose—derivedstromalcells，hASCs)为基础的组织工程骨在体 内成 骨过程中hASCs发挥的作用 ，为深入研究其体内成骨机制奠定基础。方法：酶消化法分离原代hASCs，进行传代培 养。体内实验使用 l6只裸 鼠，于其背部正中做皮肤切口，向两侧分离出4个皮下植入腔，分别植入：(1)空白；(2) 单纯 p一磷酸三钙 (31-triealciumphosphate，p—TCP)支架(支架对照组)；(3)31-TCP支架 +人成纤维细胞(阴性细胞对 照组)；(4)13-TCP支架 +hASCs(实验组)。植入后 1周、2周、4周 、6周进行取材，每时间点取4只裸鼠，其中2只 裸鼠的标本经处理后进行扫描电镜 (scanningelectronmicroscope，SEM)观察 ，另外 2只裸 鼠的标本制成组织学切 片，进行 HE染色分析。结果：SEM观察可见实验组植入2周后 ，hASCs周围即出现大量细胞外基质，至4周时细胞 外基质开始出现明显的矿化，6周时可见矿化基质进一步增多。HE染色分析可见实验组植入2周后hASCs即开始 分泌嗜酸性较强的均质细胞外基质，至4周时细胞外基质中出现了强嗜酸性的类骨组织 ，6周时新生类骨组织面积 明显增大，结构更加典型。在其他组均未见矿化基质和类骨组织生成。结论：人脂肪基质细胞在体内成骨过程中 发挥了关键的作用，包括分泌大量细胞外基质，促进细胞外基质矿化和引导新生类骨组织形成。 [关键词]脂肪组织；干细胞；组织工程 ；骨生成 [中图分类号】R336 [文献标志码]A [文章编号]1671—167X(2012)06-0916-05 doi：10．3969／j．issn．1671-167X．2012．06．023 EffectOfhumanadipose．derivedstromalcellsOilosteogenesis／nvivo LIUrun—song ，LV Long—wei ，ZHOU Yong—sheng ，MA Gui．e ，ZHANG Xiao ，FAN Cong ，SHAO Xiao (1．DepartmentofProsthodonties，PekingUniversitySchoolandHospitalofStomatology，Bering100081，China：2．Body SculptureCenter，PlasticSurgeryHospital，ChineseAcademyofMedicalSciences，Beijing100144。China) ABSTRACT Objective：Toexploretheeffectofhumanadipose．derivedstromalcellsfhASCs)ontheos． teogenesisduringtheprocessofboneformationinvivo，andtolaytheofundationoffurtherinvestigations onthemechanism ofinvivoosteogenesisofhASCs．M ethods：hASCswereisolatedfrom adiposetissue bythemethodofcollagenasedigestion，andwereroutinelyproliferatedandpassaged．Intheinvivostudy 16nudemicewereusedand4groupsweresetandimplantedsubcutaneouslyintothebackofnudemice： (1)blank；