中华眼镜蛇蛇毒因子体外凝血的机理.pdfVIP

维普资讯 一 f 示记免疫分析与 临床 1999年 3月第 6卷第 1期 13 · 基石出研 究 · 中华眼镜蛇蛇毒因子体外凝血的机理 _苦 胡笑克 丁忠仁 黄 守坚 定 2 7 口 摘要 在以往的实验中已经证明．CYT(中华眼镜蛇蛇毒因子)在体内具有抗血小板凝聚的作 用，但在体外宴验 中却发现它有使血小板聚集的作用：为了探讨 CVF体外 引起血小扳凝聚的机 理 我们用放射免疫分析法删定了 C％T 作用后的血小扳 内cAMP(环磷酸腺苷)的变化。结果表 明，不同剂量 CVF均可使血 小板 内 cAMP含量 降低 。其 中生理盐 水对照组 血小扳 cAMP含量 (pmol／lO。血小板)为 252±68，CVF低浓度组为 170±65．CVF中浓度组为 162±73，CVF 高浓度组为 178±89：这表明 CVF体外对血 小板的直接作用是通过血小板内信号传导系统降 低 cAMP水平 ．导致血小板聚集 。 关键词 血小扳 聚集 中华眼镜蛇靶毒因子 环磷酸腺苷 羌枣鱼 — — — — ’——— ———’’ t————～ 在抗补体因子对肺损伤的保持作用的研 材料和方法 究中，发现油酸、凝血酶和大肠杆菌 内毒素引 起的肺损伤的组织有广泛的血管内凝血、切 1 买验动物与分组 片有 明显的小动脉血栓形成等 。在预先用过 实验用体重 300～400克的 SD雄性大 CVF(cobravenom factor，中华眼镜蛇蛇毒因 鼠，共设 5个组 ：生理盐水 (NS)对照组 ，CVF 子)的动物，这些病理改变 明显减弱或消失， 低浓 度 组 (61．7nmol／L)，CVF 中浓 度 组 证明CVF在体内具有抗血小板凝聚的作用， (195nmol／L)，CVF高浓度组 (617nmol／L)， 这是 由于 CVF在体内耗竭补体，使其血小板 阳性对 照药 PGE1(前列腺 素 E1)(0．6ug／ 对凝血酶诱发 的血小板聚集和 ATP释放反 mL)对照组。 应等减弱所致 “。但在体外实验 中却发现 2 试剂 CVF起着使血小板聚集的作用，这与 CVF CVF自行从 眼镜 蛇蛇毒 中经分离纯化 的体 内作用完全相反。为了探讨 CVF体外 获得，cAMP放射免疫分析试剂盒购 自上海 引起血小板聚集的机理 ，我们进行了血小板 中医药大学。 内第二信使 cAMP(环磷酸腺苷)的测定，因 3 方法步骤 为 cAMP的减少可导致血液 的高凝状态，引 (1)大 鼠颈动脉插管取血，通过离心取得 起血小板凝聚。 富血小板血浆 。血浆计数血小板数后，取定 量血小板悬液按 上述 5组分别加入生理盐 水 ，前 4组于 37℃震荡温浴 25min，PGE1组 本课题受国家 自然科学基金(N资助 于 37℃震荡温浴 2min，结束时用 240mol／L 作者单位 ：中山压科大学实验棱医学教研室 (胡关克)，药