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中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2013, 35(4): 417–422
研究论文
RASSF1A逆转A549-DDP细胞对顺铂耐受的实验研究
侯玉磊 吴艳凤 薛成军 李凤增 罗海霞 郑 倩 陈 辉*
(重庆医科大学附属第一医院检验科, 重庆 400016)
摘要 RASSF1A表达下降可能是肺癌对顺铂获得性耐药的主要因素之一。为了寻找预测顺铂
对肺腺癌A549细胞化疗敏感性的生物标志, 该研究以对顺铂耐药的同源A549细胞(A549-DDP)为研
究对象, 利用转染技术上调RASSF1A表达。RT-PCR和Western blot检测转染前后RASSF1A在mRNA和
蛋白水平的表达情况。在不同浓度顺铂作用下, 通过MTT法、克隆形成实验检测转染前后细胞活力
并计算IC50和计数克隆形成数。在同一浓度顺铂作用下, 流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡分数的改
变。结果显示: 顺铂作用24 h后, 转染RASSF1A表达质粒的A549-DDP细胞对顺铂IC50 明显低于A549-
± vs ± P RASS-
DDP细胞[(39.9 6.3) µmol/L (53.0 5.8) µmol/L, =0.036]; 不同浓度顺铂连续作用5天后, 转染
F1A表达质粒的A549-DDP细胞形成的克隆数明显少于A549-DDP细胞组; 在同一浓度顺铂作用下, 转
RASSF1A ± vs ±
染 表达质粒的A549-DDP凋亡分数明显大于A549-DDP细胞[(7.10 0.01)% (3.80 0.18)%,
P=0.002]。结果提示, RASSF1A表达下降可能是肺腺癌A549细胞对顺铂获得性耐药的重要因素之一,
RASSF1A表达在临床上作为肺癌患者顺铂化疗耐受的生物标志值得进一步研究。
关键词 肺癌A549-DDP细胞株; RASSF1A表达质粒; 顺铂
RASSF1A Resensitizes A549-DDP Cell to Cisplatin
Hou Yulei, Wu Yanfeng, Xue Chengjun, Li Fengzeng, Luo Haixia, Zheng Qian, Chen Hui*
(Clinical Laboratories, the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China)
Abstract Low expression of RASSF1A may be a critical cause for acquired chemo resistance of lung cancer.
In order to find a biomarker predicting chemo sensitivity of A549 cell to cisplatin, cisplatin-resistant human A549
cells (A549-DDP) were chosed and transfected with a RASSF1A plasmid to enhance the expression of RASSF1A .
Semi-quantitative RT-PCR and Western blot analyses were performed to confirm the expression of RASSF1A
mRNA or protein before and after cell
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