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182 LabeledImmunoassavs&ClinMed.Ju11.2011.v0】.18,No.3 Cy5标记的DNA荧光毛细生物传感器的研究 王艳君 ,李永生 ,高秀峰 ,杨全玉 (1.四川省卫生学校,四川 成都 610100;2.四川大学,四川 成都 610041) 摘要 :探索了以Cy5(吲哚-5一菁)作为荧光标记物的DNA荧光毛细生物传感器的可行性。以荧光毛细分析法 (fluorescence capillaryanalysis,FCA)为基础,在毛细管内壁通过poly-l·lysine将20-mer-SSDNA探针固定,制成DNA荧光毛细生物传感 器 (DNA~uorescencecapillarybiosensor,DNA—FCB),DNA.FCB吸入含 Cy5标记的靶DNA液杂交 ,通过检测杂交产物的荧 光强度,实现对靶 DNA的定性和定量分析。结果显示,样品用量51.LL,Cy5标记的靶 DNA浓度在0.2一1.21~mol/L(2.4 ~ 24mg/L)范围内和荧光强度有 良好的线性关系(Y=129.61X+21.233,r=0.9970);RSD3.5%;检出限为0.18~.mol/L。 结论:以Cy5作为荧光标记物的DNA荧光毛细生物传感器能达到定量检测靶 DNA的目的。该方法操作简便 ,试样、试 剂用量少 ,毛细管及DNAFCB可循环使用,测定成本极低,能大大减少环境污染。 关键词:DNA; 荧光毛细生物传感器; Cy5;DNA—FCB 中图分类号:R-331 文献标识码:A 文章编号:1006—1703(2011)03-0182-04 StudyonDNA FluorescenceCapillaryBiosensorLabeledwithCy5 WANGYan-jun,LIYong—sheng,GAOXiu—feng,YANGQuan—yu (HealthSchoolofSichuanProvince,Chengdu610100,China) Abstract:ToinvestigatethefeasibilityofDNA fuorescencecapillarybiosensorlabeledwithCy5,basedonflue— rescencecapillaryanalysis(FCA),theDNAbiosensorusingcapillaryasimmobilizationanddetectioncarrierof DNAprobe(20一mer—ssDNA、wereimmobilizedontheinnerwallofcapillarybypoly一1一lysinetomakeDNAflu— orescencecapillarybiosensor(DNA—FCB).TheDNA—FCBwashybridizedwithcomplementarytargetDNAla- beledbyCy5.ThetargetDNAwasqualifiedorquantifiedbydetectingthefluorescentdensityoftheCy5using F.4500spectrofluorometer.TheresuhsshowedthattheconcentrationofthetargetDNA hadgoodlinearitywith thefluorescentintensityin rangeof0.2~1.2/zmol/Lwhen samplevolumewas5 L.RSD waslowerthan 3.5%.Th econcentrationdetectionlimitofthetargetDNA was0.391~mol/L.Th eDNA—FCB canbeusedto qualifyorquantifythetargetDNA.DNA—FCBissimplewithadvantagesoflowersampleandreagentvolumes, repeateduseofcapillary,thelowesttestcost,andreducethepollutiontoenvironment.

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