纳米颗粒对猪GV期卵母细胞低温保存效果的影响.pdfVIP

32卷5期 中 国 生物 医学工程学报 V01．32No．5 October2013 2013年10月 C^inese如urrInZ矿Biomed如口ZE昭inee一，曙 纳米颗粒对猪GV期卵母细胞低温保存效果的影响 李维杰1 周新丽h 刘宝林1 戴建军2 吕福扣1 张德福2 徐 利2 ‘(上海理工大学生物热科学研究所，上海200093) 2(上海农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室，上海20l106) 摘要：纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的重要发展方向，但纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保 存的报道较少。本研究将羟基磷灰石(HA)、二氧化硅、三氧化二铝、二氧化钛等4种纳米颗粒添加到低温保护剂 中，使用cryotop法冷冻猪GV期卵母细胞，使用形态观察和荧光染色的方法，研究其对细胞存活率和发育率的影 响。结果显示在实验浓度范围内，HA较其它纳米颗粒对猪卵母细胞的毒性低，当浓度低于0．5％时，细胞发育率为 loo％；低温保护剂中添加O．1％HA纳米颗粒，发育率比其它组显著提高，可以达到22％，且HA的粒径对结果影 响不大；当低温保护剂中添加o．05％粒径为60nm的HA颗粒时，卵母细胞冷冻复温后发育率会进一步从14．7％ 提高达到30．4％。在低温保护剂中添加适宜浓度的HA纳米颗粒，可以减少复温过程中的重结晶现象，促进细胞 的冷冻存活率和发育率，保存效果与浓度相关，而与纳米颗粒的粒径关系不大。 关键词：纳米微粒；卵母细胞；低温保存；发育率 中图分类号 R318．52文献标志码 A 文章编号0258．8021(2013)05-060l-05 TheEffectof onVitrincation ofPorcine Nanoparticle GV·StageOocytes LI ZHOUXin．Lil’ Wei．Jiel LIUBao．LinlDAIJian．Jun2LVFu．KoulZHANGDe—Fu2XULi2 1(胁mule旷B如mem口zn曲，lo坳，踟池邝蚵o，s^口ng^耐如rsc诂，Ice口耐‰^肋l[ogy，s^口r劬di200093，傩i眦) 2(Anim口Z口以％‘捌n口，y尺黜edrc^kI血n地，SA^Js，s^口帽^毹^fⅡn如咖口Z研k60mlo，yo， A卵-Ge肼t池口耐B他edi昭，s^口增^“20l106，C^加口) isa new inthenext of Abstract：Nano—cryopresenrationpromisingway generationcryopreservationtechnology； in vitrificationhasbeen This theefkct howeVer，usingnanoparticles oocytes raI℃lyreported．paperinvestigated of titaniumdioxide inthe on hydroxyapatite(HA)，silica，aluminumoxide，and nanopaniclescryoprotectant the surviValrateand rateof