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抗浪鱼的核型研究 孔令富，毕保 良 ，李莲军，汪 霞，王俊相，吴志蕾，李永能，李 洁 (云南农业大学动物科学技术学院，云南昆明650201) 摘 要 ：抗浪鱼核型研究可为抗浪鱼的物种生物 学研 究、资源保护 、管理 以及种质鉴定提供依据。采用 腹腔注射 PHA和秋水仙素体 内注射法，采集抗浪鱼前 肾，利用 “低渗一空气”干燥法制片，分析抗浪鱼染色体 核型。结果表明，抗浪鱼细胞染色体数 目在 46～50之 间，以染色体数 目2n=48所 占比例最大；共有 7对 中 部着丝粒染色体、1O对近 中着丝粒染色体 、7对近端着丝粒 ，染色体 的总臂数 NF一82；与其他鲐亚科鱼类核 型对比，在一定程度上显示 出抗浪鱼在进化上的独特性。研究结果为进一步研 究抗浪鱼的物种生物学以及 物种鉴定提供 了基础资料。 关键词：抗浪鱼；核型；染色体 中图分类号 ：$961 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—5038(Z012)12—0107一O4 抗浪鱼 (Anabariliusgrahami)原产于中国第二深 较小 ，数 目偏多，研究工作难度较大，进展较为缓慢， 高原淡水湖云南省抚仙湖 ，隶属硬骨鱼纲 (Acti— 截止 2005年 ，已报道染色体核型的鱼类有2100种左 nopterygii)，鲤 形 目(Cypriniformes)，鲤 科 (Cyprini— 右，约 占总数 1O ，且大多数为淡水鱼类，集中在鲤形 dae)，鲐亚科 (Cultrinae)白鱼属 (Anabarilius)。抗浪 目、鲶形 目、鲈形 目上 。近年来，对鲤科鱼类染色体研 鱼是一种珍稀地方鱼种 ，20世纪 90年代以后 ，由于过 究比较多，发现染色体数 2ni00广泛存在于鲤科鱼 度捕捞及银鱼的引进放养，抚仙湖抗浪鱼的产量逐年 类中，但核型却各不相同。本研究 目的在于通过对抗 下降，濒临灭绝。目前，关于抗浪鱼的研究主要是对 浪鱼染色体组型的研究，为该鱼种质的细胞遗传学检 其生物学特性的描述 ，包括形态特征、生活习性、生长 测提供相应的参数，为抗浪鱼的系统演化、进化地位 特点、繁殖习性的描述和濒危原因的分析及对策。目 的确定提供基础资料，同时为抗浪鱼的选育种工作提 前 ，除了对抗浪鱼线粒体 DNA和遗传多样性有部分 供细胞生物学、细胞遗传学方面的理论依据。 研究_j外 ，对抗浪鱼的染色体的研究报道较少。 1 材料与方法 染色体是鱼类遗传 的物质基础 ]，其数 目和形 1．1 材料 态结构具有该物种的特征，一定程度上也反映了生物 成年健康抗浪鱼8条，购 自云南漫湾有限责任公 进化的历史[4]，在鱼类的遗传变异 中，染色体起着重 要的作用，对鱼类染体数量、形态与结构的研究，在遗 司水产养殖场 ；甲醇、冰醋酸、KC1、生理盐水、Giemsa 传学中的基因定位、杂交以及多倍体育种等领域起着 染色原液、植物血凝素 (phytohaemagglutinin，PHA) 重要的作用l5]。核型是指把动物、植物、真菌等的某 和秋水仙素 (colchicine)为宝生物工程 (大连)有限公 一 种有机体或某一分类群的体细胞 内整套染色体拍 司产品。 摄下来 ，按照它们相对恒定特征排列起来的图象 。对 1．2 方法 核型作比较分析主要是确定它们之 间在核型上的相 1．2．1 鱼 肾细胞悬液的制备、低渗处理及 固定 同或不同特征，即核型的同源性和异源性，核型的共 PHA经小牛血清溶解后按 10ffg／g体重胸腔注射抗 同特征常是鉴定不同物种或分类群之间近缘关系的 浪鱼，14h后按1ffg／g体重注射秋水仙素，3h后放血 重要依据，而对核型异质性的探究是区分不同分类群 取肾，于8g／L的生理盐水中清洗