快速高分离度液相色谱法测定贝类中软骨藻酸残留量.pdfVIP

第27卷增刊 分析试验室 Vo1．27．Supp1． 2008年 l2月 ChineseJournalofAnalysisLaboratory 20o8—12 快速高分离度液相色谱法测定贝类中软骨藻酸残留量 吴映璇 ，林 峰，林海丹，邵琳智 (广东出入境检验检疫局 ，广州 510623) 摘 要：介绍了用快速高分离度液相色谱 (RRLC)测定贝类中记忆丧失性贝类 毒素软骨藻酸的方法。样品以 (甲醇)：(水)=l：l的溶液提取，经LC—SAX 强阴离子柱固相萃取净化，以ZORBAXSB．C18柱(1．8 ，2．1×50mm)分离，乙 腈+0．1％三氟乙酸水溶液等度洗脱，1min内完成检测。用RRLC外标法定量 分析。在 10，15，2O，40mg／kg4个添加水平下进行了验证试验，方法在0～18 mg／L范围内有 良好的线性关系，相关系数大于0．999，回收率为79．3％～ 106％。 关键词：软骨藻酸；快速高分离度液相色谱法；固相萃取；贝类 软骨藻酸(domoicacid，DA)是一种天然神经性 1 实验部分 氨基酸，可从被污染的贝类中分离、提取获得。人 1．1 仪器与试剂 们食用毒化的贝类，可引起记忆丧失、眩晕、昏迷 AGILENT1200快速高分离液相色谱仪 (附 甚至死亡等。症状一般在O．5～2h内出现。根据 DAD检测器)，配置有二元输送系统、自动进样系 这一中毒特征，该毒素被命名为记忆丧失性贝类 统、柱温箱、色谱数据处理系统。Milli．Q超纯水器 毒素 (anmesicshellfishpoisoning，ASP)。目前对贝 (美国Millipore公司)；漩涡振荡器 (德国IKA)；高 类毒素中毒，尚无特效治疗的药 物，主要靠预防， 速离心机，转速≥8000r／min，(Sigma4K15)；可控 在毒素容易暴发的季节里 (如每年的4、5月份和 温摇床，HZQ—Q(哈尔滨东联电子技术开发有限公 9、t0月份)，不吃或少吃贝类产品，来减轻或避免 司)；12通道半 自动固相萃取装置；固相萃取柱： 贝类毒素中毒事件的发生。为了控制有毒的贝类 3ccLC．SAX或其它等同效果的固相萃取柱，(使用 出口，扩大贝类的出口量为国家多创汇，我们国 前依次用6mL甲醇、3mL水、3mL甲醇+水 (1+ 家在各口岸对出口贝类的质量实施监控管理，避 1，体积比)的溶液活化，保持柱体湿润)。甲醇、 免了贝类毒素超标造成的国际贸易间的纠纷，使有 乙腈和甲酸为液相色谱级；三氟乙酸为优级纯。 价值的贝类大量繁殖、出口，有效地保证了贸易 其他试剂均为分析纯 (广州试剂厂)。记忆丧失性 双方的利益和人类的健康。不少国家对其制定了 贝类毒素软骨藻酸 (纯度90％，Sigma公司)。 2O g／g的限量标准。目前测定贝类中软骨藻酸的 方法主要有高效液相色谱法 (HPLC)n ]、毛细管 C02H 电泳法 、小白鼠生物学试验法6、液相色谱一质 谱联用法 等。本文采用快速高分离液相色谱法 (砒 C)技术建立了测定贝类中软骨藻酸残留量的 图I 软骨藻酸的化学结构 分析方法，在一分钟内完成检测，极大地提高了 分析速度。方法准确、简便、分析时间短 ，结果令 1．2 色谱条件 人满意，可应用于贝类中的实际检测工作。