龟鹿二仙胶抵抗化疗小鼠骨髓CD34^＋细胞凋亡的研究.pdfVIP

维普资讯 · 172 · 中国中医药科技2008年5月第 15卷第3期 May2008．Vo1．15No．3 · 中药研究与开发 · 龟鹿二仙胶抵抗化疗小鼠骨髓 CD34+细胞凋亡的研究* 林胜友 沈敏鹤 刘振东 冯正权 徐 莉 将福升 吴良村 (浙江省中医院 杭·州310006 浙江中医药大学生命科学系 杭·州310053) 摘 要 目的：探讨滋阴益气补阳法(龟鹿二仙胶)对化疗小鼠骨髓 c 造血干 ／祖细胞凋亡的影响。 方法：小鼠采用腹腔注射环磷酰胺(CTX)造模 ，分组处理 ，9天后处死。流式细胞仪检测骨髓c 细胞凋 亡；RT—PER法检测其Cyt—C、bd一2rnIA的表达。结果：CTX组FITC ／PI一细胞比例较盐水组明显升高 (P0．05)；而高、中、低 3个剂量组及单纯中药组FITC ／PI一细胞比例明显降低，与单纯CTX组 比较，差 异有显著性 (P0．01)。单纯CTX组Cyt—CmRNA表达较盐水组升高(P0．05)，而中、低2个剂量组及 单纯中药组表达较单纯CTX组降低 (P0．05)；单纯CTX组bel一2mRNA表达较盐水组减少；而高、中、低 3个剂量组及单纯中药组bel一2mRNA表达较单纯CTX组明显升高，差异有显著性 (P0．01)。结论：滋 阴益气补阳法组方的龟鹿二仙胶能有效抑制化疗小鼠骨髓c 造血干／祖细胞凋亡，上调bcl一2mRNA 表达可能是其机理之一。 主题词 化疗后骨髓抑制，中医药疗法 @龟鹿二仙胶，治疗应用 小鼠 近年来临床应用发现，滋阴益气补阳法不仅能明显减轻 工生物工程有限公司合成提供。 肿瘤患者化疗后免疫功能低下，还有缓解血红蛋白、血小板 1．4 方法 减少的作用，能有效减轻肿瘤患者化疗后骨髓抑制。为进一 14．1 实验分组及造模给药 荷瘤小鼠72只，随机分成 6 步探讨其对骨髓造血功能的影响，对荷瘤小鼠应用该法组方 组 ，每组 12只。高剂量组：腹腔注射 CTX10mg／kg，灌 胃中药 的龟鹿二仙胶治疗后骨髓 c 细胞凋亡及其凋亡相关基 19rCkg；中剂量组：腹腔注射 CTX10rag／kg，灌胃中药9．5∥kg； 因Cyt—C、bel一2mRNA的表达进行了实验研究。 低剂量组：腹腔注射 CYX10mg／kg，灌 胃中药 4．75rCks；单纯 1 材料与方法 CTX组 ：腹腔注射 CTXl0mrCks，灌胃生理盐水 0．3ml；单纯中 1．1 实验动物 6～8周龄昆明种小鼠，体重(20±2)g，接种 药组：腹腔注射生理盐水0．2ml；灌胃中药 19异／kg；生理盐水 正常传代的肝癌细胞 后备用，浙江中医药大学动物实验 组：腹腔注射生理盐水0．2ml，灌胃生理盐水 0．3ml。均连续 中心提供。 给药 9天。 1．2 实验药物 滋阴益气补阳方药龟鹿二仙胶 ：由鹿角胶 1．4．2 指标测定 第 10天颈椎脱臼法处死小鼠，截取后腿 6g、龟板9g、人参9g、枸杞子 15g等组成 ，煎汁，过滤，浓缩至 胫骨，制备骨髓单细胞悬液。流式细胞仪检测骨髓 c 细 100％浓度，使每毫升含生药 1克，分装，置4~C冰箱备用，批 胞凋亡 ；RT—PCR法检测 Cyt—C、bel一2mRNA的表达。 号上述工作委托浙江省 中医院制剂室专业人员 1．4、3 统计学方法 数据处理采用 SPSS10．0软件包 ，计量 制剂。环磷酰胺 (CTX)：0．2g／)J~，江苏恒瑞医药股份有限公 资料用 (±s)表示；多组间资料比较采用方差分析，多个样 司产品，批号：o5021121。 本均数间的