山东地区樱桃绿环斑驳病毒（CGRMV）的RT-PCR检测及外壳蛋白基因的克隆.pdfVIP

山东农业大学学报 (自然科学版)，2012，43 (2)：206—210 JournalofShandongAgriculturalUniversity(NaturalScience) 山东地区樱桃绿环斑驳病毒 (CGRMV)的RT—PCR 检测及外壳蛋白基 因的克隆 王文文 ，2，宗晓娟 ，陈立伟 。，王甲威2，魏海蓉 ’。 徐 丽2，孟艳玲 ，严雪瑞 ，刘庆忠 ’ (1．沈阳农业大学植物保护学院，辽宁沈阳 110866；2．山东省果树研究所，山东泰安 271000； 3．山东省果树生物技术育种重点实验室，山东 泰安 271000；4．IU东威海市农业科学院，山东威海 264200) 摘要：为调查我省甜樱桃感染樱桃绿环斑驳病毒 (CherryGreenRingMottleVirus，CGRMV)情况，本研究以 甜樱桃 (PrunusaviumL．)品种 “红灯”叶片总RNA为模板，根据CGRMV基因组序列设计特异引物，对山 东地区37份甜樱桃 “红灯”样品进行RT—PCR检测 ，共检测出19份阳性样品。利用 CGRMV外壳蛋白基因 序列引物，从阳性植物样本中分离到约800bp的目的片段 ，克隆测序，序列分析显示该片段全长807bp，编 码268个氨基酸，与GenBank中已登录的CGRMV分离物的外壳蛋白基因序列一致性为87％～97％ ，氨基酸 序列相似性为95％一99％。该结果表明山东地区甜樱桃生产园中感染CGRMV的病例较为普遍。 关键词：甜樱桃；樱桃绿环斑驳病毒；RT—PCR检测；外壳蛋白；基因克隆 中图分类号：S662．5 文献标识码：A 文章编号：1000—2324 (2012)02—0206—05 DETECTIONoFCHERRYGREENRINGMoTTLEVⅡtUS(CGRMV)AND IsoLATIoN OF ITSCoATPRoTE GENESFRoM SⅥ 凰T CHERRY IN SHANDoNG PRoVD CE WANGWen—wen ·～，ZONGXiao—iuan～，CHENLi—wei·一，WANG Jia—wei·。 WEIHai—rong～，XU Li～，MENG Yan—ling ，YAN Xue—ruih UUQing—zhong·。’ ， (1．CollegeofPlantProtection，ShenyangAgriculturalUniversity， Shenyang110866，China； 2．ShnadongInstimteofPomology， Taian271000，China； ， 3．ShandongKeyLaboratoryofFruitBiotechnology Breeding，Taian271000，China； 4．WeihaiAcademyofAgriculturalScienceofShandongProvince，Weihai264200，China) Abstract：InordertoinvestigatetheinfectionofCherryGreenRingMotlieVirus(CGRMV)fromsweetcherry (Prunusavium L．)inShandongprovince，totalRNAwasextractedrfomtheleavesofthesweetcherryeuhivar RedLamp：IhespecificprimersweredesignedcorrespondingtotheCGRMV genomesequenceandusedforhte RT—PCRdetec