尿调蛋白酶联免疫吸附试验检测方法的建立及其在IgA肾病中的应用.pdfVIP

北 京 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) JOURNALOFPEKINGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES) Vo1．44 No．2 Apr．2012 ·307 · · 技 术 方 法 · 尿调蛋白酶联免疫吸附试验检测方法的建立及其在 IgA肾病中的应用 刘 颖 ，陈育青 ，周晶晶 ，韩 佳 ，梁 或 ，李雪迎 ，张 宏 (1．北京大学第一医院肾内科，北京大学肾脏疾病研究所，卫生部肾脏疾病重点实验室，慢性肾脏病防治教育部重 点实验室，北京 100034；2．北京大学第一医院医学统计室，北京 100034) [摘 要】目的：建立尿尿调蛋白的酶联免疫吸附试验 (enzyme．1inkedimmunosorbentassays，ELISA)检测方法，并对 IAe 肾病患者的尿尿调蛋白水平监测进行进一步验证。方法：以多克隆抗体作为包被抗体，单克隆抗体作为检测抗 体，建立尿调蛋白的快速双抗夹心检测方法 ，检测其精确性及重复性 ，随机选取55例尿液标本，同时以商品化试剂 盒与本实验方法进行检测，比较 166例 lae 肾病患者和正常人 的尿尿调蛋白水平。结栗：获得 的标准 曲线为 0．78～12．5 g／L，实验室内变异系数为7．5％，实验室间变异系数为7．9％。55例尿液标本的商品化试剂盒与本 实验方法结果比对，相关系数为r=0．615，P0．001；166例 IAe 肾病患者的尿尿调蛋白／尿肌酐比值低于正常人。 结论：尿尿调蛋白的ELISA检测方法灵敏，重复性较好，可运用于大样本的人群检测，leA肾病患者的尿尿调蛋白分 泌低于正常人。 [关键词】尿调蛋白；酶联免疫吸附试验；肾小球肾炎；IGA [中图分类号]R692．31 [文献标志码】A [文章编号]1671-167X(2012)02-0370-04 doi：10．3969／j．issn．1671-167X．2012．02．031 Establishmentofenzyme-linkedimmunosorbentassay (ELISA)formeasuringhu- manurinaryuromodulinandapplicationofthemethodinpatientswith IgA nephrop- athy LIUYing。，CHENYu—qing ，ZHOUJing-jing，HANJia，LIANGYu ，LIXue—ying，ZHANGHong (1．RenalDivision，PekingUniversityFirstHospital；PekingUniversityInstituteofNephrology；KeyLaboratoryofRenal Disease，MinistryofHealthofChina；KeyLabof ChronicKidneyDiseasePreventionandTreatment，Ministry of Educa- tion；Beijing100034，China；2．DepartmentofStatistics，PekingUniversityFirstHospital，Beijing100034，China) ABSTRACT Objective：Toestablishamethodofenzyme—linkedimmunosorbentassay (ELISA)to measureurinaryuromodulinandexploretheurinaryuromudulinlevelinIgAnephropathy．M ethods：The rbabitanti．humanuromodulinpolyclonalantibodieswerecoatedonplatestocaptureuromodulinandthe mouseanti—humanuromodulinmonoclonalantibodywasusedasdetectingantibodytosetupELISAproce— dure．TheprecisionandrepeatabilityofthisELISA methodwereevaluated，andthen thismethodwas comparedwiththecommercializedTamm．．HorsfallGlycoproteinELISAKitbyexami