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第28卷第 1期 同济 大 学 学 报 (医学 版 ) V01．28No．I
2o07年 2月 JOURNALOFTONGJIUNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE) Feb．，2007
· 基础研 究 ·
大 鼠皮肤成纤维细胞 MyoDcDNA
转染后的形态变化
汪进益 ，范慧敏 ，刘中民 ，丁 一 ，马 亮2，李 杨2
(1．同济大学附属东方医院胸心外科，上海 200120；2．同济大学附属东方医院细胞治疗 中心，上海 200120)
【摘要】目的 探讨运用肌肉转录调节因 (myoblast—determining，MyoD)基因转染使大鼠皮肤成纤维细胞(de肌al
fibroblasts，DFs)转化为肌细胞的可能性。方法 采用差速贴壁法培养 Sprague-Dawley(SD)大鼠的DFs；利用携带
MyoDeDNA的真核表达载体 pLenti6／V5一DES~-MyoD转染培养的大鼠DFs，经Blasticidin筛选2周后挑选转基因
单克隆细胞，传代培养，进行细胞形态学观察及细胞免疫化学鉴定。结果 大鼠DFs在导入 MyoDcDNA后可见：
(1)部分细胞形态发生改变，类似骨骼肌细胞，胞体伸展 ，胞浆颗粒增多；(2)经抗DesmiD_抗体的细胞免疫化学检测
证实转染后的细胞有下游蛋白Desmin的阳性表达。结论 DFs能转化为具有潜在功能的类骨骼肌细胞，提示DFs
可成为心血管疾病基因治疗的靶细胞。
【关键词1皮肤成纤维细胞；肌肉转录调节因子；转基因；靶细胞；大鼠
【中图分类号】R329．24；R394．3 【文献标识码】A 【文章编号】1008—0392(2007)01—0006—04
M orphologicalchangesofdermalfibroblastsofrat
followingtrna sfectionwithM yoD cDNA invitro
WANGJin—yi，FANHui—rain ，L几rZhong-min ，DIN Yi，Ma—Liang ，LI-Yang
(1．Dept．ofCardiovascularandThoracicSurgery，EastHospital，Ton~iUniversity，Shanghai200120，China；
2．CellTreatmemCentre，EastHospital，Ton4~iUniversity，Shanghai200120，China)
A【ir．tract】Objective Toevaluatethepossibilityofconvertingculturedratdermalfibroblasts(DFS)toskeletal
muscleceUsbytransfectionwithmyoblast—determininggene(MyoDcDNA)，oneofthebasichelix-loop-helix
myogenicfactorsMethods DFSofSprague-Dawley (SD)ratwereisolatde andculturde withna improvde
techniqueofdifferentialnachoring velocity；MyoD eDNA wastransducde intoDFSbyusingtheeukaryotieex—
pressionvcetorpLenti6／V5一DF_ST-MyoD，nad thecellswereincubatde inmdeium containing Blastieidin for
screening for2weeks Resistnatoclonieswerepickde n
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