抗sHLA-Ⅰ免疫磁珠的制备与鉴定.pdfVIP

2011年7月第49卷第 19期 · 临床探讨 · ~sHLA-I免疫磁珠的制备与鉴定 闫绍荣 I李 强 I俞石芳 2 (1．瑞安市人民医院，浙江瑞安325200；2．温州医学院附属第一医院，浙江温州325000) [摘要 】目的 制备抗 sHLA—I免疫磁珠去除红细胞悬液和机采血小板中的sHLA—1分子。方法 将单克隆抗体W6／32以 共价偶联的方式包被制备免疫磁珠 ，以FITC标记的羊抗鼠二抗标记磁珠，用流式细胞仪鉴定包被效果。取 l0例红细胞 悬液和机采血小板上清和制备好的免疫磁珠孵育后移去磁珠，用 ELISA检测吸附前后 sHLA—I浓度变化评价吸附效果。 结果 制备的抗 sHLA—I免疫磁珠包被效率约为 75％。对红细胞悬液和机采血小板中sHLA—I的吸附效果可达到84％ 和83％。结论采用单克隆抗体 W6／32制备的免疫磁珠能有效去除红细胞悬液和机采血小板中的sHLA—1分子 ，在改善 I临床输血安全方面有广阔的应用前景。 【关键词 】可溶性组织相容性抗原 I类分子；免疫磁珠 f中图分类号 】R392．33 f文献标识码 7B f文章编号 】1673—9701(2011)19-149—02 ThePreparationandAppreciationofAnti--sHLA—-IImmuneMagneticBead YANShaoron~LIQim~ YUShf／ange 1．DepartmentofClinicalLaboratory，RuianCityPeople’SHospital，Ruian325200，China；2 ． BloodBank，FirstAffiliatedHospitalof WenzhouMedicalCollege,，Wenzhou325000，China A【bstractlObjective Toprepareanti—solublehumanleukocyteantigensI(sHLA—I)immunemagneticbeadforadsorbingand removingthesolubleHLA ～Iofredcellsuspensionandmachineadoptingplatelet．M ethods Themagneticbeadsarecoatedwith monoclonalantibodyW6／32bycovalencecoupling’Sway．Thenthemagneticbeadsaremarkedbythesheep—anti—mousesecond antibodymarkedbyFITCandareappraisedthecoatingeffectbyfloweytometer(FCM)．Tenexampleredcellsuspensionandmachine adoptingplateletsupernatantareselectedandincubatedwiththeprepared immunemagneticbead．Thenthebeadsareremovedfrom themixedliquorandthedensityofthesHLA—Iinthe,mpernatantisdetectedbyELISA tocomparethedensitychangebefi)reand afteradsorbingandappreciatetheadsorbingeffects．ResultsThepreparedanti-sHLA-Imagneticbeads’coatingefficiencyis75％． TheadsorbingeffecttosolubleHLA—Iexistinginredcellsuspensionandmachineadoptingplateletrespectivelyis84％ and83％． Conclusion Themagneticbeadspreparedwith mono