聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和均一凝胶电泳在分离及鉴定植物SOD同工酶中的比较研究.pdfVIP

第3l卷第4期 南京师大学报 (自然科学版) V01．31No．4 2008年 12月 JOURNALOFNANJINGNORMALUNIVERSITY(NaturalScienceEdition) Dec，2008 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和均一凝胶电泳在分离 及鉴定植物 SOD同工酶中的比较研究 程光宇 ，王 峰 ，陶明煊 ，陆长梅 ，吴国荣 ，常福辰 (1．南京师范大学生命科学学院，江苏 南京 210097) (2．南京师范大学金陵女子学院，江苏 南京210097) [摘要] 比较了聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳 (GPGE)和均一凝胶电泳(PAGE)在分离和鉴定 SOD同工酶方面的 应用．在GPGE中根据 值大小可将SOD谱带分为3个区：A区 值最小，对 SDS敏感，为 Mn—SOD；C区 值 最大，对SDS不敏感，为CuZn．SOD；B区谱带 值位于两者之间，对 SDS敏感，为Fe-SOD．根据 GPGE图谱上谱 带 值大小和对SDS敏感性来判断SOD类型结果与用抑制剂判断结果一致 ，它可作为一种SOD类型初步鉴定 的简便可行的方法，相同植物材料经PAGE分离后不具备这些特性．在相同牛血SOD浓度下，GPGE检测SOD灵 敏度可达 l0 mol，PAGE为 1O mol；在 1．56x10 molSOD时，在GPGE中可分辨出4条带 ，PAGE仅为2条． 枸杞Fe-SOD在 7．5％胶中 值最大，在 10％胶 中与CuZn—SOD重叠，香橼 Fe—SOD、Mn—SOD和朱桔 Mn—SOD、 CuZn—SOD在 10％PAGE中相互重叠，在 GPGE中它们都有规律地完全分离，可根据 值大小鉴别SOD类型．通 过2次电泳阐明了GPGE分离和鉴定 SOD的可靠性 ，它能有效地分离和鉴定在PAGE上重叠的3种SOD类型． [关键词] 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳，聚丙烯酰胺凝胶电泳，SOD，分离，鉴定 [中图分类号】Q503 [文献标识码]A [文章编号]1001-4616(2008)04-0097-07 ComparisonofGradientPolyacrylamideandPolyacrylamideGel Electr0ph0resisintheIsolationandIdentificationofPlantSODIsozyme ChengGuangyu ，WangFeng ，TaoMinxuan ，LuChangmei，WuGongrong ，ChangFuchen (1．SchoolofLifeScience，NanjingNormalUniversity，Nanjing210097，China) (2．JinlingCollege，NanjingNomralUniversity，Nanjing210097，China) Abstract：Thispapercomparedtheapplicationofgradientpolyacrylamidegelelectrophresis(GPGE)andpolyacrylamide geleleetrophoresis(PAGE)inisolationandidentificationofplantSODisozyme．TheresultsshowedthatSODbandson GPGEweredividedintothreeregionofA，B，CaccordingtoitsRf．TheRfofAregionSODbandwasminimum，itwas sensitiveto1％SDSandwasMn．SOD．ThenfofCregionSODbandwasthebiggest．itwasnotsensitiveto1％SDS andwasCuZn—SOD．TheRfofBregionSODbandwasbetweenAandC．itwassensi