饥饿应激对泥鳅3种组织糖原，ACP和ALP的影响.pdfVIP

第 36卷 第 6期 河南师范大学学报 (自然科学版) Z．36 N ．6 2008年 l1月 J0 乜Z0，HP竹伽 N0rm口ZU rsi (N口￡rnZScPfe) N0口．20O8 文章编号 ：1O0O一2367(20O8)O6一O158一O5 饥饿应激对泥鳅3种组织糖原，ACP和ALP的影响 康绍乐，杜启艳 ，王 萍，李宁宁，常重杰 (河南师范大学 生命科学学院，河南 新乡 453OO7) 摘 要 ：研究了饥饿应激对泥鳅肝、肠和肌肉3种组织细胞糖原、酸性和碱性磷酸酶的细胞化学变化．对泥鳅 进行饥饿处理，O～28d不喂养食物 ，29～35d恢复正常喂食．分别于 O、7、14、21、28和 35d取材 ，利用显微石蜡切 片、组织化学染色的方法检测其肝、肠和肌肉细胞糖原、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶细胞化学特征．结果表 明：随着饥 饿程度 的加深 ，糖原的量减少 ，碱性磷酸酶活性下降，酸性磷酸酶活性则增强．投喂后 ，糖原量、酸性和碱性磷酸酶活 性都有不 同程度 的恢复．整个过程中，上述变化存在组织差异性．泥鳅 中糖原量、酸性和碱性磷酸酶活性均与长期饥 饿条件下机体 的应激反应有关 ． 关键词 ：泥鳅；糖原；酸性磷酸酶；碱性磷酸酶 中图分类号 ：Q953．3 文献标识码 ：A 世界现存鱼类多达 24OO0余种，是脊椎动物中分布最广、种类最多的类群．鱼类在养殖或 自然条件下生 长 ，经常会出现营养不足甚至饥饿，有些鱼类在饥饿一段时间后恢复喂食 ，将 出现超过正常生长速度的补偿 生长_】]．关于饥饿对鱼类的影响，国内外已有许多学者做过一些研究[2]，其 中多数研究是饥饿阶段鱼类代 谢率的变化 ，而很少涉及饥饿及再投喂后鱼类的组织细胞化学变化．泥鳅在我 国分布广泛 ，食性杂 ，抗病力 强，生长快，是一种非常适合养殖的经济鱼类和试验材料．本研究对不同饥饿时期泥鳅 3种组织糖原、酸性磷 酸酶 (AcidPhosphatase，AcP)及碱性磷酸酶 (AlkalinePhosphatase，ALP)进行染色，并观察分析其变化 ，以 期丰富鱼类饥饿生理学理论 ，并为饲料的合理利用和渔业生产提供理论指导． 1 材料和方法 1．1 材料及处理 泥鳅购于新乡市集贸市场 ，体长 14～18cm，健康．对泥鳅进行适应性养殖 3d，然后开始饥饿处理．O～ 28d不投喂食物 ，29～35d恢复正常投喂．分别于 0，7，14，21，28和35d各取 3尾测定其肝脏 、消化道和肌 肉3种组织的糖原、酸性和碱性磷酸酶的变化． 1．2 切片的制备 将不同饥饿时期的泥鳅迅速处死 ，取其 3种组织于不 同的固定液中．测定糖原时用 Carnoy氏固定液 ， 4℃固定 5h．测定酸、碱性磷酸酶时用冷丙酮固定 24h．然后依次经 7096／、85 、95 乙醇各 1h，纯乙醇 I， Ⅱ分别 30min，15min进行脱水，1／2乙醇二 甲苯 3Omin，二 甲苯 工，Ⅱ各 1Omin透 明，1／2二 甲苯石蜡 3Omin，蜡 I，Ⅱ分别 30min、1h浸蜡 ，包埋 ，切片(8肚m)． 1．3 糖原的测定 参照高碘酸一希夫 (PAS)反应 引，粘贴好的切片于二 甲苯 工，Ⅱ分别 5min、3min脱蜡，1／2二甲苯乙醇 3min，纯乙醇 工，Ⅱ各 3min，95 、8596／、70 乙醇各 3min复水 ，高碘酸溶液 8min，7O 乙醇片刻 ，shiff试 剂 15min，亚硫酸溶液 (3次各 1min)，流水冲洗 5min，苏木精 5min，蒸馏水洗 ，分色，蓝化 ，1 亮绿复染 收稿 日期 ：2O08一O2一O5；修 回 日期 ：2O08—1O一1O 基金项 目：国家 自然科学基金 (3O771666)；河南省杰 出青年科学基金 (O512。0l8O0)；河南省省级动物学重点学科资助 作者简介：康绍乐 (1982一)，男，河南武陟人，河南师范大学硕士研究生，从事动物遗传学研究． 通讯作者 ：常重杰 (1965一)，男，河南禹州人 ，河南师范大学教授 ，博士生导师，E—mai1：changzhon ie@tom．c0m． 第 6期 康绍乐等 ：饥饿应激对泥鳅 3种组织糖原，ACP