猴B病毒囊膜糖蛋白gD基因的克隆表达及其诊断价值评价.pdfVIP

中国人兽共 患病 学报 2O12，28 (4) ChineseJOurnalofZoonoses 363 文章编号 ：1002—2694(2O12)04—0363—04 猴 B病毒囊膜糖蛋白gD基因的克隆表达 及其诊断价值评价* 张文韬 ，董 罡 ，袁菊芳。，马兰芝 ，张广州 ，曾 林 ，叶华虎 ，聂 奎 摘 要 ：目的 克隆表达猴 B病毒囊膜糖蛋 白gD胞外区片段，评价其诊断价值 ，为猴 B病毒快速鉴别诊断技术建立和疫 苗研制奠定基础。方法 利用 PCR扩增 gD胞外区基 因片段，测序正确后插入原核表达载体 pET28b(+)。重组质粒转化至 大肠杆菌(BI21)DE3并进行诱导表达。纯化蛋 白首先 以His抗体和 B病毒阳性血清进行鉴定，再用 ElISA评价其诊断价 值 。结果 目的蛋 白为包涵体 ，占菌体总蛋 白的 35 ，分子量约为 48kD。Western印迹显示，重组蛋 白能与猴 B病毒 阳性血 清和 His单克隆抗体发生免疫反应；32份标准阳性血清和 3O份 阴性