野油菜黄单胞菌2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸醛缩酶基因的突变分析.pdfVIP

72 ．孥 J忘 盔 gAg． Bio。i。 20D0e8c年．。122oo月8 文章编号 ：1008—3464 (2008)04—0349—05 野油菜黄单胞菌 2一酮一3一脱氧一6一磷酸 葡萄糖酸醛缩酶基因的突变分析 ， 谭旖宁 。 彭方印 ，安世琦 ，陆光涛 ，何勇强 ，唐纪 良 (1 广西大学 生命科学与技术学院，广西 南宁 530005； 9 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室，广西 南宁 530005； 0 广西职业技术学院，广西 南宁 530227) 摘要 ：野油菜黄单胞菌野油菜致病变种是发酵工业生产黄原胶 的菌种 ，通过对 Xcc8004菌株全基 因组 序列进行搜索 ，发现该菌株拥有完整的ED、EMP、HMP等糖代谢途径。为评估 ED途径对细胞功能的影 响，选择基 因组 中编码 ED途径 的关键酶——2一酮一3一脱氧一6一磷酸葡萄糖酸醛缩酶的基 因 eda进行诱变 ，构 建非极性突变体。通过对突变体表型进行分析，发现 eda基因的突变体在培养基中能够正常生长繁殖，但 其胞外多糖产量则降低 77．6 。用一段包含 eda基因的DNA片段对突变体进行功能互补，能基本恢复胞 外多糖产量 。这表 明eda基 因对细胞合成胞外多糖有重要影响，也暗示 ED途径对细胞生长是非必要 的， 而对细胞大量合成胞外多糖是必须的。 关键词 ：野油菜黄单胞菌野油菜致病变种 ；ED途径 ；2-酮一3一脱氧一6一磷酸葡萄糖酸醛缩酶 ；胞外多糖 中图分类号：Q754 文献标识码 ：A Elem entaryanalysisof2-keto-3-_deoxy。I6·p‘hospho-gluconate aldolasegeneofXanthomonascampestris TAN Yi—ning’。，PENG Fang—yin’。，AN Shi—qi。，LU Guang—tao。， HE Yong—qiang ．TANGJi—liang，。 (1 CollegeofLifeScienceandTechnology，GuangxiUniversity，Nanning530005，China； 2 GuangxiKeyLaboratoryofSubtropicalBioresourceConservationandUtilization，Nanning530005，China； 3 GuangxiVocationalTechnologyCollege，Nanning530227，China) Abstract：Xanthomonascampestrispv．campestris (Xcc)isused to producexanthangum in fermentindustry．A survey ofthe genome sequence data of Xcc 8004 strain revealed thatthis bacterium possessedED，EMP and HMP pathway．To assessthe function ofED pathway in Xcc 8004，the eda gene，which encoding 2一keto一3一deoxy一6一phospho—gluconate aldolase，wasmutated using the suicide plasmid pK18mob， and resulted nopolar integrated mutant．Phenotype analysis showed thatthe mutantgrown normally in medium， however，the extracellular poIysaccharide productionreduced 77．6 compared to thatofthewild typestrain 800