硫化氢对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用及机制研究.pdfVIP

中国科技论文在线 硫化氢对缺氧损伤的人脐静脉内皮细胞的 保护作用及机制研究# 郭薇，沈亚琪，汪智军，钟亮解，朱依谆** 5 （复旦大学药学院，上海 201203） 摘要：目的：探讨硫化氢对缺氧损伤状态下的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVEC ） 的 保 护 作 用 和 新 生 作 用 。 方 法 ： 采 用 了 噻 唑 蓝 （Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide ,MTT ）比色法和细胞刮痕损伤实验检测细胞活 力 和 新 生 作 用 。 同 时 采 用 流 式 细 胞 术 和 线 粒 体 特 异 性 探 针 10 （5,5′,6,6′-Tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide, JC-1 ）检测活性氧（reactive oxygen species, ROS ）水平和线粒体活性。随后，应用Western Blot 检测 ROS 相关蛋白的表 达情况。结果：经 MTT 比色法证明：缺氧情况下 HUVEC 细胞株在低于 600μM 浓度水平 的 NaHS 时无细胞毒性；在细胞刮痕损伤实验中经过 60μM NaHS 培养 18h，刮痕相对于 Control 组明显变窄；流式细胞术证明 60μM, 120μM, 600μM NaHS 分别缺氧 30min 后胞内产 15 生 ROS 分别是 Control 组的 96.72%、71.33%、77.02%；JC-1 试剂盒证明硫化氢对线粒体有 保护作用。另外，硫化氢和 Bcl-2 表达的提升与 Bax, Caspase-3, and Caspase-9 表达的降低呈 剂量关系。结论：证实硫化氢能够对缺氧损伤的 HUVEC 细胞系产生保护作用和促进其新生。 关键词：药理学；人脐静脉内皮细胞；硫化氢；缺氧；线粒体；保护作用 中图分类号：R96 20 Mechanism of Hydrogen Sulfide in hypoxic human Umbilical vein endothelial cells GUO Wei, SHEN Yaqi, WANG Zhijun, ZHONG Liangjie, ZHU Yizhun (School of Pharmacy, Fudan University, ShangHai 201203) 25 Abstract: Aim To investigate the protective effects and angiogenesis effects of Hydrogen Sulfide (H2S) under hypoxia condition in human Umbilical vein endothelial cell (HUVEC) cell line. Methods The study chose 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromi