壳聚糖诱导子促进喜树培养细胞喜树碱积累的研究.pdfVIP

安徽农业科学 ，JournalofAnhuiA ．Sci．2010，38(29)：16151—16153 责任编辑 熊章琴 责任校对 况玲玲 壳聚糖诱导子促进喜树培养细胞喜树碱积累的研究 董妍玲 ，潘学武 ’ ，赵小虎 ，史广宇 (1．武汉生物工程学院生物技术系，湖北武汉 430415；2．武汉大学资源与环境科学学院，湖北武汉 430079) 摘要 f目的]探讨壳聚糖诱导子对喜树悬浮培养细胞喜树碱积累的影响。[方法]在壳聚~ 8-ea喜树悬浮培齐体系中，测定培养细 胞的干重、喜树碱的产量、过氧化氢和丙二醛的含量。[结果]在喜树悬浮培养细胞第20天加入最终浓度80mg／L的壳聚糖诱导子刺激 36h后，喜树碱的总产量达到 15．21TiIg／L，是未作处理的喜树碱总产量最大值 (在细胞培养的第20天达到)的6．18倍。同时，受到诱导 的培养细胞 内过氧化氢和丙二醛的含量都急剧增加。[结论]壳聚糖诱导子的刺激能显著地促进喜树悬浮培养细胞喜树碱的生物合成。 关键词 壳聚糖诱导子 ；喜树；喜树碱 ；植物细胞培养 中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2010)29—16151—03 Cam ptothecinAccumulationInducedbyChitosanElicitorwithCellCulturesofCamptothecaacuminataDecaisne DONGYan．1ingetal (DepartmentofBiotechnology，WuhanBioengineeringInstitute，Wuhan，Hubei430415) Abstract 『0biective]Iheaim istostudytheroleofthechitosanelicitorincamptothecinaccumulationwithsuspensionculturesofCampoto— thecn∞uminat0Detaisne． M『ethod]Celldryweight，camptotheeinyield，hydrogenperoxide(H2O2)andmalondialdehyde(MDA)content wereinvestigatedinsusDensionculturesofC．acumunatainducedbythechitosanelicitor．[Result]Whenthefinalconcentrationof8Omg／L elicit0rwasaddedtothesuspensioneulturesonits20thdayofgrowth，thehighesteamptotheeinyields(15．21mg／L)wasachieveffafter36 hours’subcultures．6．18timesthatoftheuntreatedcells，whichobtain theirmaximum yieldatthe20th dayofculture．Correspondingly， higherhydrogenperoxideandmalondialdehydecontentoccurredinelicitedcellsduringsubsequentcellsuspensionsubcultures．[Conclusion] Chitosanelicitorcouldsignificantlypromoted eamptothecinbiosynthesiswithcellsuspensionculturesofC．acuminata． Keywords Chitosanelicitor；CamptothecaacuminataDeeaisne；Camptothecin；Plantcellculture 喜树碱 (Campothecin)是美国科学家 Wall等 于 1966 养而来的一个普通细胞系，详细报道请参见文献 。。悬浮 年首次在我 国特有树种喜树 (CamptothecaacuminataDe— 培养以MS作为基本培养基，添加0．1m#L激素2，4一D，0．5 caisne)中发现的抗肿瘤活性物质。进一步的研究表明，喜树 mg／LNAA和0．5m L6一BA，40g／L蔗糖 ，pH值 5．8。250 碱的独特抗癌机理是由于其抑制肿瘤细胞 内拓扑异构酶 I rnl三角瓶置于转速 100r／min的摇床上，25℃温室中黑暗培 的活性而具有细胞毒性效应的