胰岛素对危重创伤患者中性粒细胞凋亡的调节.pdfVIP

第 3O卷第 3期 河 北 医 科 大 学 学 报 Vo1．3O No．3 2009年 3月 JOURNAIOFHEBEIMEDICAIUNIVERSITY Mar． 2009 ·275 · · 论 著 · 胰岛素对危重创伤患者中性粒细胞凋亡的调节 张 焱焱 ，褚 立 明 (华北煤炭医学院附属 医院急诊科 ，河北 唐 山 063000) 【摘要】 目的 观察胰 岛素对离体危重创伤患者 中性粒细胞凋亡 的研究，探讨胰 岛素影响中性粒细胞凋亡 的 分子机制 。方法 选择危重病患者 2O例 ，采取外周静脉血并分离 中性粒细胞 ，RPMI1640培养基培养 ，分为胰 岛素 干预组和非胰 岛素干预组，每例分离的中性粒细胞平均分为 6等份 。将 中性粒细胞置入二氧化碳培养箱孵育 3、6、 12、18、24、36h后 ，用流式细胞仪检测凋亡 。结果 体外条件下中性粒细胞与胰 岛素共 同培养 3、6、12、18、24、36h 后其凋亡率升高(PO．05)。结论 与非胰 岛素干预组 比较 ，胰岛素能显著促进 中性粒细胞 的凋亡 。 【关键词】 创伤和损伤 ；细胞凋亡 ；胰 岛素 doi：10．3969／j．issn．1007—3205．2009．03．020 【中图分类号1 R641 【文献标识码】 B 【文章编号】 1007—3205(2O09)03—0275—02 多 器 官 功 能 障 碍 综 合 征 (multipleorgan 岁 。均为多发伤危重症患者 ，既往无糖尿病史。其 dysfunctionsyndrome，MODS)作为严重创伤后 的 中创伤失血性休克 4例 ，骨盆粉碎性骨折 5例 ，多发 主要并发症和死亡原 因之一 ，已引起 了外科领域广 性肋骨骨折合并血气胸 4例 ，肝脾裂伤 3例 ，脊髓损 泛的关注 。严重感染和多发性创伤可以造成 中性粒 伤合并完全截瘫 2例 ，双下肢损伤 1例 ，右肩部完全 细胞数量异常增多 ，凋亡减少 ，粒细胞的凋亡延迟是 离断 I例 。受伤原 因，交通伤 13例，高空坠落伤 2 导致细胞、组织 以及 临近和远 隔脏器损伤发展为 例 ，矿井塌方伤 2例 ，建筑工地重物砸伤 3例。血糖 MODS的重要原 因。另外 ，严重创伤使机体处于应 值 (15．36±6．01)mmol／I，中性粒细胞 (83．26± 激状态 ，引发高血糖和胰岛素抵抗。而高血糖可损 6．41) ，ISS评分 (30．75±3．71)分 ，超敏 C反应蛋 害中性粒细胞及吞噬细胞功能 。本实验以严重创伤 白(77．25±30．65)mg／I。 患者为研究对象，探讨胰 岛素是否对严重创伤患者 1．2．2 标本的采集及 中性粒细胞的分离 ：危重病患 中性粒细胞凋亡有调节作用 ，为胰 岛素应用于危重 者受伤初期 (24h)，抽取外周静脉血 4mL，置于 创伤患者的临床治疗提供理论依据 ，为预防和治疗 4℃冰箱中(6h)。中性粒细胞的分离 ：分离时先将 全身炎症反应综合症 、MODS拓展一个新 的思路 。 分层液置试管底层 ，然后将肝素化全血 以Hanks液 1 资 料 与 方 法 或 PBS液作适当稀释后 ，轻轻叠加在分层液上面 ，使 两者形成一个清晰的界面。水平式离心后 ，离心管中 1．1 主要试剂 ：RPMI1640培养基购 自美 国Sigma 会出现几个不同层次的液体和细胞带。红细胞和粒 公司。小 牛血清 购 自天 津灏洋 生物工 程 公 司， 细胞密度大于分层液，同时因红细胞遇到 Ficoll而凝 RNaseA购 自美国Amresco公司，细胞凋亡碘