淮北地区多重耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类、β-内酰胺类抗生素耐药相关基因研究.pdfVIP

· 49 · 第27卷第 1期 实 验 与 检 验 医 学 Vo1．27No．1 2009年 2月 EXPERIMENTAL AND LABORAIRY MEDICINE Fb．2Oo9 · 实验研究 · 淮北地区多重耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类、p‘一内酰胺类抗生 素耐药相关基因研究 陆士海，姚慧琳 ，刘培明，庄 楠 f安徽省淮北矿工总医院检验科，安徽淮北 235000) 摘 要：目的 调查淮北地区临床分离多重耐药铜绿假单胞i~(PseudomonasaeruginosaPA)的氨基糖苷类、3-内酰胺类耐药相关 基因流行状况 方法 采用K—B法和MIC法检测 36株多重耐药铜绿假单胞菌对 14种临床常用抗生素的耐药性；聚合酶链 反应(PCR1检测氨基糖苷类修饰酶基因、B一内酰胺酶编码基因和外膜通道蛋白OprD2基因。结果 36株铜绿假单胞菌对 l4种 抗菌药物的耐药率为 38．9％-100．0％；氨基糖苷类修饰酶基因ant(3n卜I、aac(6)一Ⅱ、aac(6)一I、aac(3)一lI、ant(2”)一I检出率分 别为63．9％、58．3％、50．O％、38．9％和 36．1％，未检出aac(3)--I基因；8一内酰胺酶编码基因TEM、DHA、CTX—Ge和 CARB的检出 率分别为77．8％、69．2％、27．8％和25．0％，OXA一1、OXA一10的检 出率均为 16．7％，VIM-2的检 出率为 13．9％，IMP—l的检 出率为 2．8％，未检出VEB、SHV、GES、PER、GIM和SPM-2基因，有58_3％的菌株存在外膜通道蛋白OprD2基因缺失。结论 淮北地 区多重耐药铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗生索的耐药主要与氨基糖苷类修饰酶基因ant(3”)一I、aac(6)一lI、aacf6’一I有关；对 B一内酰胺类抗生索耐药主要与1’EM、DHA、CTX-Ge、CARB及外膜通道蛋白0prD2基 困缺失有关。 关键词：铜绿假单胞菌；氨基糖苷类；B一内酰胺类；多重耐药性 中图分类号R446．5．Q939．92，R378．99+l 文献标识码A 文章编号 1674—1129(2009)01—0049—03 ：10-3969，jivan．1674一l129．20o9．O1．019 铜绿假单胞菌 (PseudomomasaemginOsaPA)是 伯菌 ATCC700603、铜绿假单胞菌 ATCC27853购 自 临床最常见的条件致病菌。也是医院感染f如肺炎 、 卫生部临床检验中心，产 VIM一2、TEM、SHV、CTX— 败血症 、尿路感染 、伤 口感染等)最重要 的致病菌，容 M型酶由安徽医科大学第一附属医院检验科徐元 易引起医院感染的爆发和流行 。近年来 。随着广谱 宏教授惠赠 抗生素的广泛应用和不合理使用 ．使得 PA对 3-内 l：1．2 主要仪器与试剂 PCR扩增仪f杭州博 日科 酰胺类抗生素 (包括青霉素类 、头孢菌素类 、单环 B一 技有限公司产品)；电泳仪 匕京六一仪器厂)；紫外凝 内酰胺类和碳青霉烯类1及氨基糖苷类抗生素的耐 胶电泳成像分析系统由安徽医科大学第一附属医院 药率一直处于较高水平 ，并且呈逐年上升趋势 【¨。为 提供。细菌总 DNA提取试剂盒 f德国QIAGEN公 了解淮北地区PA多重耐药机制．0我们对来 自3家 司)；DNAMarkerf上海天根化工有限公司)，M—H琼 二甲以上医院临床分71~PA进行药敏试验 ．筛选出 脂 、肉汤培养基(杭州天和微生物试剂有限公司)；引 36株多重耐药株。对36株多重耐药 lPA，我们检测 物由中山大学达安基因股份有限公司合成 ．测序由 了6种氨基糖苷类修饰酶基因、“种 臼