对强荧光背景拉曼光谱定量分析的研究.pdfVIP

第30卷，第7期 光谱学与光谱分析 01 and 2 0年7月 Spectral Ju|y，2010 Spectroscopy Analysis 对强荧光背景拉曼光谱定量分析的研究 吴正洁1，黄耀熊h，王成2，黎绍发2 1．暨南大学生物医学工程研究所，广东广州510632 2．华南理工大学计算机科学与工程学院，广东广州 510640 摘要针对拉曼光谱定量分析中的难点问题一对具有强荧光背景物质的定量分析，文章分别对具有较强 荧光背景的不同浓度下的纯甲醇溶液及不同浓度比例的甲醇和乙醇混合溶液的拉曼光谱数据采用新的归一 化法结合基线校准技术进行拉曼光谱定量分析；同时，对由数据采集时的时空差异所引起的样品数据组间 的波动性进行了研究。模拟时空变化来采集定量分析中所需的谱数据，并使用统计学方法评价样品的组间 差异，讨论了此方法对样品组间差异的消除效果。研究证明，此方法具有较好的分析精度和消除不同样品组 数据的组问差异的能力，对甲醇的定鼍分析，其相对误差为4．7％，组间数据的相对标准偏差为4．2％。从而 使对具有强荧光背景干扰的溶液进行简单、快速、精确的定量分析成为可能。 关键词激光拉曼光谱；强荧光背景；归一化法；基线校准；定量分析 ‘ 中图分类号：0657．3文献标识码：A 量分析的相对误差达到19％，即使结合基线校准技术处理 引 言 后，其相对误差仍有12％，定量分析精度不能满足分析要 求。 激光拉曼光谱具有制样简单、分析快速、无损、以及所 此外，在样品的拉曼数据采集过程中，由于数据采集时 检测的样品仅需微量即可满足测量要求等诸多优点的新技 的时空差异以及仪器差异所引起的样品数据组间的波动性会 术[1’2]。但是，其数据分析理论还不如传统技术完善，相对于极大地影响样品拉曼光谱定量分析的准确性和精确性[1l’1引。 气相、液相色谱法的较高精度而言，较大的分析误差率限制 而在拉曼光谱分析中讨论和评价组间差异在国内外相关文献 了拉曼光谱定量分析的应用。到目前为止，激光拉曼光谱分 中至今未见有报道。由于实验环境和样品采集时间的差异都 析技术多用于样品的定性分析[3’4]，仍较少应用于定量分析可能会导致相同样品的拉曼谱数据产生差别，故目前用于拉 上[s-73。尤其是对具有强荧光背景物质，如甲醇及其混合溶曼光谱分析的数据采集都是在同时间同地点进行的。而对于 液的定量分析，更是拉曼光谱定量分析中的难点问题。 拉曼光谱数据的分析，尤其是定量分析，如果能集合不同时 归一化法是目前常用的一种拉曼光谱数据处理的方 空下大虽样品数据，建立一个分析数据库，必能提高定量分 法睁10]。其方法间的差异在于归一化中比值参照对象的不 析的精度。因此，有必要对如何评价样品数据组间差异以及 采用何种数据处理方法能有效消除该差异这两个问题做进一 同。Sant’Am等[9]所报道的归一化方法是在检测样品中加 入另一种物质，利用这种物质的拉曼谱峰作为内标峰。但 步研究。 是，引入另一种物质谱峰作为内标峰的做法局限性较大，须 本文针对具有强荧光背景的甲醇及其混合溶液采用新的 保证引入的物质对检测物质不会发生任何影响，且如检测物 归一化方法～取每组物质最高浓度下拉曼谱中谱强最高点作 质是溶液的话，引入的新物质也必须是能溶于水的物质。这 为此组所有数据归一化的参照，结合基线校准技术进行拉曼 种归一化方法的适用范围以及实验