提高BrdU标记成年大鼠在体脑神经干细胞增殖和分化效率的研究.pdfVIP

162 GuangxiMedicalJournal，Feb．2009，Vo1．31，No．2 wardastrocytomausingaCre／loxP—basedadenovirussystem[J]． Third edifion，1997，Elservierpress，New York． BrainRes，2006，1081(1)：34—43． [6] KumaiY，OoboshiH，KitazoneT，eta1．Brainischemiaaugmentsexo— [2] GonzalezSC，McMesnaminMM，CharttonHM，eta1．Readministration focaltransgeneexpressionofadenovims—mediatedgenetransfertoex-- ofadenoviralgenedeliverytodopamineneurons[J]．Neumreport， pendymainhypertensiverats[J]．ExpNeurol，2003，184(2)： 2007，18(1)：l609—1614． 904—9l1． [3] 崔卫刚，郭 灵，曾庆堂，等．提高腺病毒表达载体扩增效率的研 [7] SugiuraS，KimgawaK，TanakaS，eta1．Adenovimsm·ediatedgene 究[J]．解剖学研究，2006，28(2)：94—95． transferofheparin-b·indingepidermal growthfactor-l·ikegrowthfactor [4] 邓祥发，郭 灵 ，曾庆堂，等．提高重组腺病毒载体提纯和滴定效 enhancesneurogenesisandangiogenesisafterfocalcerebralischemia 率的研究[J]．广西医学，2006，28(1)：23—25． inrat[J]．Stroke，2005，36(4)：859—864． f51 PaxinosG，WatsonC．Theratbraininstereotaxiecoordinates[M]． (收稿13期：2008—10—19 修回31期：2008—11-23) 提高BrdU标记成年大鼠在体脑神经干细胞增殖和分化效率的研究▲ 蓝 玲 郭 灵 (广西医科大学人体解剖学教研室，南宁市 530021) 【摘要】 目的 探讨合理利用BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)单标成年在体脑神经干细胞增殖以及双标成年在体脑神经干细 胞分化的策略。方法 在BrdU通过腹腔注射6h后或在BrdU腹腔注射后 14～21d将大鼠灌注固定，继之用邻片进行H—E染色 以作定位 ，分别对脑组织切片进行Brdu单标或Brdu+NT(神经丝，成熟神经元的标志物)、Brdu+GFAP(胶质原纤维酸性蛋 白， 成熟星形胶质细胞的标记物)以及Brdu+GC(半乳糖脑苷脂，成熟少突胶质细胞的标记物)的双标免疫组织化学反应，光镜下观 察和计数单标或双标的阳性细胞。结果 Brdu单标阳性细胞多见于侧脑室的SVZ(室管膜下区)和SGZ(齿状回颗粒下区)，而 BrdU+NT阳性细胞多位于嗅球和齿状回的颗粒细胞层 ，BrdU+GFAP阳性细胞多见于SVZ或 SGZ；BrdU+GC阳性细胞数最少， 散在分布于以上四个部位 内。结论 在进行BrdU标记脑神经干细胞前应该制定优化组合方案 ，以获得最佳的单标和双标的识 别效果。 【关键词】 BrdU；脑神经干细胞；神经丝；胶质原纤维酸性蛋白；半乳糖脑苷脂；大鼠 【中图分类号】 R322．85 【文献标识码】 A 【文章编号】0253-4304(2009)02-0162-02 ImprovementsforBrdU singly-·markedord