溶藻弧菌诱导马氏珠母贝血淋巴cDNA差减文库的构建及分析.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 溶藻弧菌诱导马氏珠母贝血淋巴 差减文库的构建及分析 王忠良 简纪常 鲁义善 王 蓓 陈 刚 吴灶和 广东海洋大学水产学院广东 湛江 广东海洋大学南海水产经济动物增养殖重点实验室广东 湛江 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东 湛江 仲恺农业工程学院广东 广州 摘要 为了探讨马氏珠母贝免疫防御机制筛选免疫防御相关功能基因以致病性溶藻弧菌人 工感染的马氏珠母贝血淋巴为材料采用抑制性差减杂交技术构建了溶藻弧菌诱导的 马氏珠母贝血淋巴 差减文库以马氏珠母贝管家基因 作为差减指标检测该文库 的差减效率对选取的 个阳性克隆进行测序及生物信息学分析 结果显示该文库的差减 效率可达 倍 阳性检测显示差减片段为 对随机挑取 个克隆的测序结 果显示共获得 个有效 序列通过 同源性比对 有 个 序列 占 与数据库中已知功能蛋白质具较高同源性其中 个序列 占 与 免疫防御相关基因同源此外 个 占 在数据库中未发现同源序列 研究表 明 技术能有效富集马氏珠母贝血淋巴差异表达基因研究结果为探索马氏珠母贝免疫 基因作用机理和调控机制奠定了基础 关键词 马氏珠母贝 溶藻弧菌 抑制性消减杂交 文库 中图分类号 文献标志码 马氏珠母贝 是我国南方培 技术使快速灵敏地分离和筛选机体差异表 育海水珍珠的主要贝类在我国海水养殖业中占 达基因成为可能并已成功应用于筛选和鉴定贝 有重要地位但随着养殖规模的扩大和养殖历史 类的差异表达基因 等 利用 技术 的延长病害问题也日趋严重导致海水珍珠产量 分析了文蛤 在细菌感染前 和质量的显著下降严重地威胁了我国海水珍珠 后血淋巴中基因表达的差异分离到 个差异 产业的健康持续发展 然而有关马氏珠母贝 表达的功能基因其中 为免疫相关功能基 免疫防御机制特别是分子免疫防御机制和免疫 因这些功能基因的获得以及随后的表达分析 相关功能基因的研究还处于初级阶段 因此探 为探讨文蛤免疫防御机制提供了基因功能水平的 讨马氏珠母贝分子免疫防御机制筛选参与免疫 参考 等 构建了细菌感染杂色鲍 防御调控相关的功能基因对于揭示马氏珠母贝免 后的血淋巴 差减文库并从文 疫抗病机制提高机体抗病力实现遗传改良十分 库中得到 个差异表达基因荧光定量分析表