杂色鲍血细胞中一氧化氮合酶活性的鉴别.pdfVIP

维普资讯 第 28卷 第 6期 海 洋 水 产 研 究 Vo1．28，NO．6 2007年 12月 MARINE FISHERIESRESEARCH Dec．。2007 杂色鲍血细胞 中一氧化氮合酶活性的鉴别 王广军 谢 骏 余德光 石存斌 潘厚军 乌 兰 杨小静 (广东省水产动物免疫技术重点实验室 中国水产科学研究院珠江水产研究所 ，广州 510380) 摘要 一氧化氮合酶 (Nitricoxidesynthase，NOS)是催化 L一精氨酸与O2产生一氧化氮(NitricOX- ide，NO)的一种合成酶，它广泛存在于生物体的各个器官和组织 中，其活力大小可通过测定NO合成 量的多少来决定。NO作为一种新型生物信使分子、效应分子和免疫调节分子，参与机体多种重要的 生理病理活动，可以通过非特异性地杀伤细菌、真菌、寄生虫及病毒等，增强机体的非特异性免疫。本 文采用生物化学法，以副溶血弧茵和脂 多糖为刺激 因子 ，并采用硝酸盐还原酶法测定 了No的水平 ， 对杂色鲍血细胞 中的NOS活性进行 了初步鉴别。结果表 明，加入副溶血弧茵组或 LPS组 No水平 显著高于对照组 (P0．05)，孵育4h后分别为对照组的 1．84和 1．92倍 ，孵育8h后分别为对照组 的2．38和 3．05倍 ，而且这一反应 能被 NoS抑制剂 L—NAME所阻断，说 明杂色鲍血细胞 中存在 NOS活性 。 关键词 杂色鲍 一氧化氮合酶 活性 鉴别 中图分类号 Q789；$944．4 5 文献识别码 A 文章编号 1000—7075(2007)06—0007—06 Identification ofNOSactivityinHaliotisdiversicolorhaemocytes WANGGuang-jun XIEJun YU De—guang SHICun—bin PAN Hou—jun WU Lan YANGXiao-jing (GuangdongKeyLaboratoryofAquaticAnimalImmuneTechniques，PearlRiverFisheryResearch Institute， ChineseAcademyofFisherySciences，Guangzhou510380) ABSTRACT Nitricoxidesynthase(NOS)isubiquitousinorgansandtissuesofalllivingor— ganisms，whereitcatalyzestheconversionofL—argininetoL—citrullineandproducesnitricoxide (NO)．ItsactivitycanbedeterminedbymeasuringthequantityofNO．NO isinvolvedinmulti— piephysiologicalfunctionsasanew biologicalmessengermolecule，effectivemolecu1eand im— munologyregulationmolecule．Ittakespartinmany importantphysiologicalandpathological reactions，andkillsbacteria，fungi，parasiteorvirusthroughimprovingthenon—specificimmune function．In thisstudy，theNOS activity inHaliotisdiversicolor haemocyteswasident edas inducedbyVibrioparahaemolyticusandLipopolysaccharide(LPS) TheNO concentrationwas