桃花粉管通道法转基因技术的初步研究.pdfVIP

中国摩学c邑握 2009，25(05)：38—42 ChineseAgriculturalScienceBulletin 桃花粉管通道法转基因技术的初步研究 万春雁，韩明玉，赵彩平，侯玉珏，丛 芳，田玉命 (西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100) 摘 要：以曙光为试材，对桃花粉管通道法转基因技术进行探索性研究，结果表明：(1)活体人工授粉后， 24h花粉开始在柱头上萌发授粉后48h已有大量的花粉管长至花柱上端；授粉后96h大量的花粉管生 长至花柱的中部；授粉后 144h大量的花粉管到达花柱基部。(2)确定外源DNA的注射时间为人工授粉 后的144h；花柱横切滴加法注射方式不适用于桃；3-外源质粒DNA浓度为0．2mg／L时，发育期内其坐 果率都显著高于其它浓度水平。 关键词：桃；花粉管通道法；注射时间；注射方式；注射浓度 中图分类号 ：$662．1 文献标识码 ：A A PreliminaryStudyonTransgenicTechnologyofPollen-tubepathwayinPeach (Prunuspersica1．Batseh) WanChunyan，ttanMingyu，ZhaoCaiping，HouYHjue，CongFang，TianYuming (CollegeofHorticulture，NorthwestAFUniversity，YanglingShannxi712100) Abstract：ExperimentwasconductedwithShuguang(Prunuspe~ica1．Batsch)forstudyingtheapplyingof Pollen-tubepathwayinpeach．Resultsshowed：(1)24hafterpollinationinvivo，pollensgerminatedonthe stigma；After48h，96h，144hplentyofpollen—tubesrespectivelyreachedtotheupper，middle，bottom ofstyle． (2)Thebesttimetoinoculatewas144hafterpollination；Theinjectionmethodofaddingthecrosscutonthe stigmawasnotsuitableofrpeach；Therateoffruitsettingwasbetterthanotherconcentrationwhenwas0．2m ． Keywords：peach，pollen-tubepathway，injectiontime，injectionmethod，injectionconcentration 转基因技术是指把 目的基因与适当的载体相连接 中国学者周光宇提出 ，在作物上 已有较多运用，并在棉 形成重组DNA，并将它引入到适当的寄主细胞 中进行 花、小麦、大豆、水稻、甜瓜等中获得了转基因植株[2,6-71。 复制和表达，以获得具有 目的基因性状的新植株 ]。 该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株，技 它具有简便、经济、转化频率高、易于操作等特点。主 术简单，周期短。目前，该技术在木本植物上运用较 要的转基因方法有农杆菌介导法、基因枪法、微注射 少，仅在苹果上有报道rs。该文对桃花粉管通道法转 法、电击法和花粉管通道法等 1。 目前，农杆菌介导法 基因技术进行探索性研究，以期初步确定外源DNA的 在桃遗传转化研究中已有报道[3_5]。它建立在组织培养 注射时间、方式、浓度，并对及其适用性进行探讨。 基础上，依赖于高频的再生体系。而桃的再生率低，且 1材料与方法 不稳定，桃的遗传转化体系尚未建立”]，这制约了桃转 1．1材料