几种分子标记技术的比较及其在中药材鉴定中的应用.pdfVIP

2011年 第 46卷 第 8期 生 物 学 通 报 几种分子标记技术的比较及其在中药材鉴定中的应用术 杨 宁 白 雪 刘效瑞 z 刘建丽 李盼盼 李巧峡 文 蕾 (1西北师范大学生命科学学院 甘肃兰州 730070 2定西市旱作农业科研推广 中心 甘肃定西 743000) 摘要 分子标记技术是指 能够反 映生物个体或种群之 间基 因组 中某种差异 的特异性片 段 ，是 DNA水平上遗传 多态性的反映，大多数DNA分子标记是 以电泳谱带的形式表现个体 之 间的DNA差异 。对几种分子标记技术进行 了比较 ，并就其在 中药材鉴定方面的应用 以及意 义做 以综 述 。 关键词 分子标记 中药材 鉴定 中国图书分类号 ：Q946；Q255 文献标示码 ：A 我 国中药材资源丰富，药用动植物达 1万多 基 因组总 DNA为模板 ，利用 PCR技术随机扩增得 种 ，是 中药材 的主产 国，对 中药材 的研究有几千年 到一系列的多态性DNA片段，通过凝胶 电泳将长 的历史。中药材的品质关系到临床用药的安全有 短不同的DNA片段分开 ，溴化乙锭染色后在紫外 效 ．发展道地药材是实现 中药现代化的关键 ，然而 灯下观察扩增产物的多态性 。因为在 RAPD中筛选 道地药材与非道地药材在形态和生药性状等特征 出的引物都各不相 同，所 以每一个 引物在基因组 上 的差别并不 明显 ，给应用传统方法鉴别道地药 DNA序列中都有其特定的结合位点，如果与其结 材带来 了极大的困难 ，要实现 中药现代化 ，保证用 合的位点发生突变等，就可能导致引物的结合位点 药的安全性和有效性 ，寻求准确、便捷 的中药材鉴 在基因组中的分布发生变化 ．那么扩增出的产物就 别方法成为当务之急 。 相应地会发生变化 ，从而表现 出多态性 。 分子标记技术是指能够反映生物个体或种群 该技术操作简便快速 ，省时省力 ，DNA用量 之间基 因组 中某种差异 的特异性片段 ．是 DNA水 少 ．同时无需设计特定的引物 。扩增产物具有丰富 平上遗传多态性 的反映．大多数 DNA分子标记是 的多态性 ，如果使用一系列随机引物 (20—40个)， 以电泳谱带 的形式表现个体之间的DNA差异。分 其检测 区域可扩大到整个基 因组 ，能反映整个基 子标记技术 以其准确性高、重复性好等特点在农 因组的变化，所 以该技术被广泛应用于遗传多样 作物种属鉴定、遗传多态性等方面广泛应用，但其 性 、种群遗传 、数量遗传和特定基因的标记和定位 在 中草药研究中的应用仍十分有 限．本文介绍 了 等许多领域 。汪小全 [1]等用随机扩增多态性 随机扩增多态性 DNA(RAPD)。限制性片段长度多 DNA(RAPD)标记方法对来 自湖南和 四川 的75个 态性 (RFLP)，扩增长度片段多态性 (AFLP)，相关 银杉个体进行 了遗传 多样性 的检测 。由于 RAPD 序列扩增多态性 (SRAP)，微卫星 DNA(SSR)等多 分子标记一般表现为显性遗传 ，其 PCR易受到实 种分子标记技术并进行 了比较 ，而且就其在 中药 验条件 的影响，对反应条件要求很严格 ，并且 材鉴定中的应用 以及意义做 以综述 ，以期为分子 RAPD的稳定性与重复性较差 ，不太令人满意 ，反 标记技术在 中草药上 的应用提供部分资料支持 。 应 中的诸多因素都对扩增结果有一定 的影响 ．为 1 几种分子标记技术 了得到较稳定的结果 ，各种反应参数 ，例如温度 ， 1．1 RAPD(randomamplifiedpolymorphismDNA1 Mg 、dNTP、引物