槲芪散对肝癌前病变大鼠肝脏线粒体结构的影响.pdfVIP

维普资讯 中药药理与临床 2008；24(1) 槲芪散对肝癌前病变大鼠肝脏线粒体结构的影响 丰 平 ，刘树红，李 霞，李 向利，王学江一 ，史争鸣 (首都医科大学基础医学院，北京 100069；北京积水潭医院，北京 100035) 摘 要 目的：探讨槲芪散对肝癌前病变大鼠肝脏线粒体结构的影响。方法：用二乙基亚硝胺建立Solt．Earber二步肝癌前短 期动物模型。以槲芪散对肝癌前病变大鼠进行治疗 。通过 电镜观察大 鼠肝脏的线粒体结构变化。结果 ：二 乙基亚硝胺所 引起 的肝 癌前病变大鼠可出现肝细胞线粒体肿胀、空泡和嵴消失，槲芪散可减轻大鼠肝癌前病变模型肝细胞 内线粒体肿胀。结论：槲芪散可 减轻 由二 乙基亚硝胺所 引起的肝癌前病变大鼠肝脏线粒体结构的损伤 。 关键词 肝癌前病变；槲芪散 ；线粒体结构 肝癌前病变是指病理上易发生癌变的肝组织异常，主要表 1．4 方法 基本按Solt—Farber模式进行 J。大鼠腹腔一次性 现为肝组织非典型增生。其发生是一个复杂而相对缓慢 的过 注射DEN200mg／kg体重，2周后饲以含0．015％二乙酰氨基芴 程，有些机理尚难解释明晰，诊断上也存在一定困难，因其在 (2-AAF)饲料5周 ，实验第3周末按施行大部肝切除术 (PH)， 肝病发展中的特殊地位，十分有必要对其进行研究探讨。我们 治疗组于PH后 1周开始经 胃饲给槲芪散，持续至实验结束 ，连 前期的研究工作已证实，槲芪散具有明显的阻断肝癌前病变的 续给药4周；预防给药组于造模前 1周开始给槲芪散，持续至实 作用，可使GGT灶的发生数和灶面积明显减少 ，．GT·II阳性率 验结束，连续给药8周 ；正常组常规饲养。第9周末，禁食24小 明显下降，对受 AFBl和2-AAF的毒性所降低的动物体重的增 时后断颈椎处死 ，于肝脏左叶相同部位留取肝组织切成 1mm × 长有一定拮抗作用-1“J。为进一步探讨槲芪散的抗癌作用机 1mm×1mm大小固定于 3％戊二醛中，4℃保存 电镜标本用 理，我们应用二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝癌前病变模型，观察 3％戊二醛和 1％锇酸双重固定后 ，丙酮逐级脱水 ，70％饱和醋 槲芪散对肝癌前病变大鼠肝脏线粒体结构的影响。 酸铀作块染，环丙烷浸透后用环氧树脂618包埋。瑞典 LKB— 1 材料与方法 Navo超薄切片机切片(500)，铅铀双染色JEM-200OEX透射电 1．1 试验药物 槲芪散为由槲寄生、黄芪、郁金等8味中药制 镜观察肝组织超微结构改变并照相。 备的无糖颗粒，使用前用水稀释成每 m1含生药038g。 2 结果 1．2 动物 SD雄性大 鼠(SPF级)，6周龄，体重 135～149 正常对照组大鼠肝细胞线粒体形态规则 ，表面平滑，线粒 克，由首都医科大学动物部提供，58只大鼠随机分为6组 ：模型 体的嵴正常、清晰；少见脂滴，线粒体 内室中充满均质性物质 ， 组 、治疗大 (15g／Kg)、中(8r／Kg)、小 (4r／Kg)剂量组 、单纯肝大 电子密度中等，其中可见基质颗粒 (图1)。模型组大鼠肝细胞 部切除组和正常组。 线粒体可见明显肿胀，嵴不发达 ，断裂、模糊或消失，密度增 1．3 试剂 二甲基亚硝胺 (DEN)、二乙酰氨基芴 (2-AAF)、二 加 ，(图2)。小剂量中药组线粒体仍有轻度肿胀 ，嵴模糊不清 甲基亚砜 (DMSO)购 自Sigma公司；5．FU为上海旭东海普药 (图3)，而中剂量和大剂量中药组大鼠的线粒体丰富，肿胀基本 业有限公司产品 消失，嵴较清晰且数量接近于正常大鼠肝细胞 (罔4、5) 图1 正常t她组 (8000×) 图2 模型组 (8000×)