法舒地尔对大鼠颈动脉重度狭窄所致认知功能障碍和细胞凋亡的保护作用.pdfVIP

· 3743 · 法舒地尔对大鼠颈动脉重度狭窄所致认知功能障碍和细胞凋亡的保护作用 冉昌丽 李耀彩 张其梅 张 强 (三峡大学第一临床医学院神经内科，湖北 宜昌 443002) (摘 要] 目的 观察法舒地尔对大鼠颈动脉重度狭窄所致认知功能障碍和细胞凋亡的保护作用。方法 采用大鼠双侧颈总动脉重度狭窄模 型，SD大鼠随机分为假手术组、狭窄组和法舒地尔组，造模成功后，分为2、4W两个时相点。治疗组法舒地尔8．35ms／kg腹腔注射，2次／d，从造模成 功2w后开始给药，分别持续2、4w。Morris水迷宫实验用于检测大鼠的空间学习记忆能力 ；HE染色观察颈动脉狭窄处横截面积狭窄率的变化；HE 染色观察大鼠海马神经元的组织形态学变化；免疫组化方法分析海马区凋亡相关蛋白bcl-2及bax免疫阳性细胞数的变化情况；采用TUNEL染色法 检测海马区神经细胞的凋亡。结果 重度颈动脉狭窄能够引起大鼠的学习记忆损伤，表现为逮避潜伏期的延长和平台象限游泳距离占总游泳距离 百分比的缩短，凋亡相关蛋白bci2的低表达和bax的高表达，以及海马区神经细胞的凋亡率明显增加。法舒地尔腹腔注射可显著改善损伤大鼠的 学习记忆能力，抑制b 蛋白的表达和增加bcl-2蛋白的表达，海马区神经细胞凋亡率无明显增加，改善神经元结构异常，治疗4w与浚疗2w效果相 似，无统计学差异(P0．05)。结论 法舒地尔对大鼠颈动脉重度狭窄所致的慢性脑缺血有保护作用，提示其可能在认知功能障碍以及血管性瘤呆 的治疗中发挥积极有效的治疗作用。 (关键词] 法舒地尔；认知功能障碍；颈动脉狭窄；细胞凋亡 [中图分类号] R743．9 (文献标识码] A (文章编号) 1005~202(2010)24-3743}瓤； 脑血管病是引发血管性痴呆 (VD)的主要原因，而脑血管 部滴少量地塞米松 ，同时少量青霉素(溶于生理盐水中)滴于术 病中以缺血性脑血管病发病率居高…，防治 VD的关键是以各 野中，缝合伤口。假手术组只暴露双侧颈总动脉但不结扎，其 种方式治疗原发性脑血管疾病和改善脑功能。法舒地尔是 余处理同模型组大鼠。大鼠重度狭窄颈动脉面积狭窄率为 Rho激酶特异性的抑制剂，具有神经保护及抗凋亡作用 ，但 7O％ ～99％ 。 其改善认知功能障碍的抗凋亡机制尚未完全清楚。因此 ，本研 1．4 行为学测试 于各组大鼠给予相应干预措施前及其后 究观察法舒地尔对慢性脑缺血损伤大 鼠的学习记忆功能和细 2、4W，行Morris水迷宫试验，测试大 鼠的逃避潜伏期和游泳距 胞凋亡及相关基因表达的影响。 离百分比。 1．5 标本的选取与制备 于各组大鼠给予相应干预措施前及 1 材料与方法 其后2、4W后，用 10％水合氯醛腹腔麻醉后 ，分离双侧颈总动 1．1 药品和试剂 盐酸法舒地尔注射液，购 白天津红 日药业 脉及开腹腔及胸腔，暴露心脏，剪开右心耳，经升主动脉用 股份有限公司；兔抗鼠bc1-2抗体、兔抗鼠bax抗体、免疫组化 0．01％肝素生理盐水冲净血液 (2min内)，继用预冷为4℃的 染色(sP)试剂盒，购 自福州迈新生物技术公司；细胞凋亡原位 含多聚甲醛4％的固定液(磷酸盐缓冲液 (PBS)配制，pH7．4] 检测(TUNEL)试剂盒，购 自南京凯基生物发展有限公司；双花 进行灌注固定1h，直到动物全身呈僵直状态，灌流结束后，截 扁豆凝焦素 (DBA)显色试剂盒，北京中杉金桥生物技术有限公 取颈总动脉狭窄处，做横截面切片，取狭窄处前后各 3个切面， 司；乙醚，购 自天津市科密欧化学试剂有限公司；水合氯醛，购 并断头取全脑，常规脱水、透明、浸蜡、包埋，选取海马部位，将 自天津市科密欧化学试剂有限公司。 蜡块切成4 m厚的冠状切片，HE染色观察血管管腔及海马组 1．2 动物及分组 成年