绿色木霉HZ012发酵生产几丁质酶的研究.pdfVIP

第 卷 第 期 中 国 食 品 学 报 6 3 Vol.6 No.3 年 月 JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnology Jun.2006 2006 6 绿色木霉HZ012发酵生产几丁质酶的研究 于 平 励建荣 (浙江工商大学生物工程系 杭州 ) 310035 摘要 为探讨绿色木霉发酵合成几丁质酶的最优化培养条件,测定了各种不同培养条件下绿色木霉发酵合成 几丁质酶的活力。结果表明:用0.9%几丁质和 3.0%葡萄糖作为双碳源时几丁质酶的产量最高达 0.192U/mL, 高于单独使用葡萄糖或几丁质作为碳源时的最高产量 以 蛋白胨作为氮源时几丁质酶的最高产量高于用 ; 1.0% 酵母膏、 硫酸铵、 牛肉膏和 亚硝酸钠作为氮源时的最高产量 发酵液的最佳初始 为 , 1.0% 1.0% 1.0% 1.0% ; pH 5.0 最佳微量元素添加量为 2mL/L;在上述最优化培养条件下培养44h时几丁质酶活力达到最高值 0.248U/mL。 该方法获得的几丁质酶活力与Kapat等人报道的用Trichodermaharzianum生产几丁质酶的结果相比,酶活提 高33%以上。 关键词 绿色木霉HZ012 几丁质酶 培养条件 文章编号 ( ) 1009-7848200603-0026-05 几丁质酶可降解几丁质生成几丁寡糖和N- 质酶奠定了基础。 乙酰氨基葡萄糖。由于降解产物具有重要的生理 功能,因此在食品、医药、化工和农药等行业具有 1 材料与方法 重要的应用价值,其制备技术也越来越引起人们 1.1 菌种 的广泛兴趣。用化学方法生产几丁寡糖和 乙酰 N- 绿色木霉HZ012为本实验室筛选的几丁质 [1] 氨基葡萄糖有很多困难 ,因此利用几丁质酶生产 酶高产菌株。 菌种保存在PDA斜面上,置于 4 已引起人们的重视,而生产高效廉价的几丁质酶 ℃冰箱中备用。 是其中的关键所在。自Monreal等首次报道绿色 1.2 主要仪器和试剂 木霉 ( )能够合成几丁质酶以 Trichodermaviride 721分光光度计:上海第三分析仪器厂;恒温 [2] 来 ,由于木霉几丁质酶在生物防治和真菌细胞壁 水浴锅:上海精宏实验设备有限公司; 离心 80-2 降解等方面的独特作用,有关研究开始增多。 机:上海手术器械厂;台式冷冻恒温振荡器:江苏 Ulhoa等人研究了Trichodermaharzianum合成几 太仓市实验设备厂。几丁质:中国医药上海化学试 丁质酶的分子调控机制,并对产酶条件进行了初 剂公司;蛋白胨:上海生工生物工程有限公司;吐 步探讨[3] 。Kapat等人对Trichodermaharzianum生 温 :上海华美生物工程有限公司;其它试剂均 80 产几丁质酶培养基的碳源和氮源组成进行了优