血卟啉衍生物与血红蛋白相互作用的光谱特性研究.pdfVIP

-第27卷，第11期 光谱学与光谱分析 2OO and NoVeInber，2007 7年l1月 SpectroscopySpectralA11alysis 血卟啉衍生物与血红蛋白相互作用的光谱特性研究 冯尚源h2，陈 荣弘，杨文琴1，李永增2，黄祖芳2，廖小华2 1．福建师范大学化学与材料学院实验中心，福建福州350007 2．福建师范大学医学光电科学与技术教育部重点实验室，福建福州350007 摘要采用荧光光谱法和紫外一可见吸收光谱法研究了在不同温度下，血卟啉衍生物(HPD)与血红蛋白 (Hb)结合反应的荧光猝灭光谱行为。证实由于非辐射能量转换机制，HPD对Hb有较强的荧光猝灭能力。 I吼。 得相关结合常量和热力学参数。根据F6ster能量传递原理计算出临界结合位点品一3．22 关键词血卟啉衍生物(HPD)；血红蛋白(Hb)；荧光光谱；猝灭 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000．0593(2007)11—2279一04 液浓度为5nlg·mL一。 引 言 1．2实验方法 mL的HiCN血红蛋白标 在10mL比色管中依次加入5 血卟啉衍生物(HPD)作为一种光敏剂药物已广泛应用准溶液以及不同量的血卟啉，定容至10mL刻度。22℃时以 在光动力学疗法(PDT)诊治各种恶性肿瘤中。随着PDT研 究的深入，对HPD与蛋白质相互作用的研究已显得十分重 在HPD作用下的荧光猝灭光谱。再把与上述相同的溶液放 要，它可以为光动力学疗法提供理论参考。血红蛋白的功能 在水浴中加热到30℃，同样按顺序扫描Hb溶液以及Hb在 是哺乳动物血液中的氧载体，是生命机体进行各种生理活动 HPD作用下的荧光猝灭光谱。然后在入950紫外一可见分光光 的重要承担者。由于它含有色氨酸和酪氨酸等芳香氨基酸残 度计上分别测这两种溶液的吸收光谱以及把两者等量对掺后 基。在紫外光激发下，血红蛋白分子具有较强的内源荧光发 混合溶液的吸收谱。最后，在BOXCAR平均器上测Hb标准 射，研究卟啉类化合物对蛋白质的荧光猝灭，对于获取蛋白 溶液以及Hb与HPD混合溶液的荧光寿命。 质分子的信息[1]，阐述卟啉类药物在体内的作用机理，了解 其在血液中的存在形式，从而探索其抗癌机制，有着重要的 2结果与讨论 意义。生物医学中药物分子与血清蛋白的研究较多，而与血 红蛋白相互作用的研究则较少报道，本文利用荧光光谱和紫 2．1硼m对lIb溶液的荧光猝灭光谱 外吸收光谱法研究(HPD)与血红蛋白(Hb)结合作用的特征，蛋白质分子中因含有色氨酸、酪氨酸等氨基酸而产生强 获得了初步的结果。 的荧光。当蛋白质等荧光体与其他物质相互作用而导致荧光 体荧光强度降低的现象称为荧光猝灭作用，能使荧光体光猝 1实验部分 灭的物质称为荧光猝灭剂。HPD在与Hb结合过程中不同程 度的猝灭Hb的荧光，本实验得到Hb荧光猝灭光谱见图1。 1．1仪器与试剂 2．2荧光猝灭理论 荧光猝灭过程通常有动态猝灭和静态猝灭两类。动态猝 L舢vIBDA950紫