端粒酶活性检测在滋养细胞肿瘤早期诊断中的探讨-崔小波∞.pdfVIP

维普资讯 · 718 · 中国妇 幼保 健 2003年第 18卷 端粒酶活性检测在滋养细胞肿瘤早期诊断中的探讨 胡 云 李克深 唐立明 翟 玲、 崔小波∞ 解放军第211医院 150000 【摘 要 】 目的：观察端粒酶活性在滋养细胞肿瘤 中的阳性率 ，探讨其在滋养细胞肿瘤早期诊 断 中的价值 。方法 ： 用端粒重复扩增一聚合酶链反应 (PCR+TRAP)法测定 31例绒毛膜癌标本 、37例侵蚀性葡萄胎 中的端粒酶活性 。结果 在 31例绒癌标本 中发现 31例有端粒酶 的活性表达 (100 )，在37例侵蚀性葡萄胎 中发现 35例有端粒酶活性 (95 )， 在 62例正常对 照标本 中发现有 2例端粒酶 的活性表达 (3 )，滋养细胞肿瘤组和正常对 照组 比较 ．差异显著 (尸 0．01)。结论 ：端粒酶活化是滋养细胞肿瘤 中的普遍现象 ，检测端粒酶活性对早期诊 断滋养细胞肿瘤有一定意义 。 【关键词 】 端粒酶 滋养细胞肿瘤 端粒重复扩增 聚合酶链反膻 端粒酶 (Telomerase)激活在细胞癌变 中发挥着重要作用 。 lmmol／IEC,TA．50／tmol／ldNTP，0．2p-gTS弓I物 ，1 gT 是迄今为止发现 的一个最为广泛 的肿瘤标志物 。 4g32蛋 白，2／tCi[a一。P3dCTP和 [a一P]dTTP．2．5U Taq 滋养细胞是胎儿的附属物 、对于母体可视为一种 同种异体 DNA)。室温30min使TS引物在组织端粒酶作用下延伸 。延伸 移植物 ，其病理学特 点和生物学行为不 同于其他肿瘤 。结构 良 反应结束后 ，反应体系于90(、加温 3rain，然后进行PCR循环 ， 性 的葡萄胎也具有一定 的侵蚀力 ，也可 以向宫外转移 。在 临床 共 3O个循环 。取反应产物2Ol』1于2O 聚丙烯酰胺 电泳后快速 实验 中发现滋养细胞 的这一特性 ，使得端粒酶 的活性具有不 同 干燥 ，一8O(放射 自显影 12～48h。 于一般组织的特殊性 。本实验选取绒癌和侵蚀性葡萄胎标本样 设Hela细胞提取物为 阳性对照 ，设RNA 酶预处理 的提取 本用PCR—TRAP法检测端粒酶活性 ，探索滋养细胞肿瘤临床 液为 阴性对 照 。受检标本及对 照均 同步操作 ，显影后胶片 出现 诊 断 的新 方法 。 6bp梯度带纹者为端粒酶阳性 ．无此特异性带纹者为阴性 。 1．3 统计学处理 1 资料与方法 采用 检验 。 1．1 研究对象 1．1．1 临床资料 ：1998年6月～2000年6月在我院妇产科及 2 结 果 哈尔滨 医科大学第一附属医院妇产科被临床诊 断为滋养细胞 在所有 31例绒毛膜癌标 本 中均发现有端粒酶 的活性表达 肿瘤 68例 ，其 中包括绒癌31例 ，侵蚀性葡萄胎 37例 ，并 同时 (1OOo／)，在所有37侵蚀性葡萄胎 中发现有35例端粒酶活性表 取62例正常组织作为对照组 。所有病例年龄在 18--40岁之 间． 达 (95 )．在62例孕足月正常对照组胎盘组织 中发现 2例有 平均 年 龄 26．3岁 。 端粒酶活性表达 (3 )，滋养细胞肿瘤组和正常对 照组 比较 ，差 1．1．2 标本处理 ：取手术切除或活检组织2O～40mg各 2份 ， 异显著 (PO．001)．在滋养细胞肿瘤 中端粒酶阳性率 明显高于 一 份行病理学检查 ，另一份迅速置液氮 中冻存备行端粒酶活性 正 常组织 。 测定 。 1．2 方 法