竹子染色体标本制备方法的探讨.pdfVIP

维普资讯 竹子染色体标本制备方法的探讨 j 方伟 邱建 i (浙江林学院) 染色体是主要的遗传物质基础，染色体 程 中将材料瓶轻轻摇动 1— 3次。 的相对稳定决定了生物性状遗传上的相对稳 4、后低渗 倒去酶解液后用蒸馏水冲 定，同时也为生物的变异提供 了基础，因而 洗 1— 3次，然后在双蒸水 中停留2O分钟左 也决定 了对染色体开展研究的重 大 意 义． 右，处理在25℃的恒温箱 中进行； 植物染色体研究传统上采用压 片 技 术，但 6、固定 吸去低渗液，加入新配制的 这种方法往往不能使染色体很好 地 分 散 开 3 ：l甲醇冰醋酸固定液 2— 3毫升，固定 来，陈瑞阳先生等 (1979)(1g8o)用考嬖 时间为半小时至一天； 低星彗一l对37科105种植物染色体进行了研究， 6、标本制备 吸去固定液后，挟碎材 结果令人满意。其原理是通过酶解除去植物 料，然后再滴入 2— 3滴固定 液，充 分 搅 细胞壁，经低渗处理后使染色俸分散程度更 匀，吸出细胞悬液滴于清洁载片上，并将载 好 ，我们在l987—1988年把这个方法用于竹 片斜拿 (不使悬液滴下为度 )，轻轻吹气， 子染色体标本 的制备，另外还采用了李懋学 使细胞悬液充分散开，再将载片在酒精灯火 先生的堂塑坚连 迭，两种方法各有长 焙上 来回移动，慢慢加热烘干 ； 处t但从制片效果上看t枣嬖堑鲎些优王丛 七、染色 干燥的片子用pH值为6．8的 尖压片法。在这两年的竹子染色体研究过程 吉姆萨 (Giemsa)染色液染色1O分钟左右，然 中有 一些经验教训，现整理成下文，以供参 后将载片用清水冲去染色液，把水甩净 ，空 考 。 气干燥或略为加热烘干后便可镜检。 一 (= )根尖压片涪 、 竹子染色体标本制片方法 l、材料 取生长旺盛的竹根根尖 ’ (一 )去壁低渗法 2、前处理 将根尖置于饱和对二氯苯 l、预处理 采集刚抽出之竹叶嫩芽或 水溶液中处理 5小时左右 ： 竹霰嫩芽，浸A．o．oo2N8--：~基喹啉为溶荆 3、固定与保存 经预处理的材料用蒸 配制的0．02％秋水仙索中3— 5小时 ； 馏水冲洗后放)~CarnoyI溶液 (1：3)中 2、前低渗 以刻度滴管吸去 预 处 理 固定，时间约 7— 0小时，置于冰箱 中。 药液．用蒸馏水冲洗 2— 3次，然后换入双 因材料多，故一些材料经 固定后用95嘶 蒸水低渗液，在25℃ 右肟恒温 箱中处理30 的酒精洗后放入7O％的酒精，放入冰箱中保 分钟．在野外因无恒温箱，可放在人体 口袋 存 ： 中，温度约在21--28℃范围内变化^适当延 4、解离 将材料用蒸馏水洗 2— 3敬 长处理时间 (因大部分竹芽萌发时期天气较 后倒入rⅣ盐酸，在水温6G℃左右的水煮锅 中 凉 )；