传染性皮下及造血器官坏死病毒的效果分析.pdfVIP

维普资讯 第 29卷 第 2期 海 洋 水 产 研 究 VoI．29，No．2 2 0 O 8 年 4月 M ARINE FISHERIESRESEARCH Apr．，2008 常规 PCR、实时定量 PCR检测 传染性皮下及造血器官坏死病毒的效果分析 周 优 岳志芹 梁成珠 徐 彪 朱来华 高宏伟 孙 敏 刘 荭。 汪东风 (中国海洋大学 ，青岛 266003) (。山东出入境检验检疫局 ，青岛 266002) (。深圳 出入境检验检疫局，518001) 摘要 对虾传染性皮下及造血器官坏死病毒 (IHHNV)可感染世界各地养殖对虾，给对虾养殖业 造成严重经济损失。本实验首次采用实时定量 PCR法对广西地 区的 84份凡纳滨对虾样品进行检 测 ，同时以常规 PCR检测作对照。实时定量 PCR检测阳性率为 79．8 ，常规 PCR检测 阳性率为 40．5 ，表 明广西地区养殖的凡纳滨对虾 IHHNV的感染率较高。将二者检测均呈阳性的30份样 品扩增产物进行序列分析测序 ，测序结果通过 DNASTAR软件包进行分析 ，并通过 NCBIBlast与 GenBank中的序列进行比对。结果证明，测定的是 IHHNV序 列。30份样品的 IHHNV序列很保 守，可以分为4种类型，仅有两个碱基的位置发生变异 。实时定量PCR检测 IHHNV，快速、灵敏 、准 确，特异性好 ，可以作为检测对虾感染病毒的有效方法。 关键词 凡纳滨对虾 传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV) 实时定量 PCR 常规 PCR 测序 中图分类号 $945．4 6 文献识别码 A 文章编号 1000-7075(2008)02—0090—07 EvaluationofconventionalPCR andreal—timequantitativePCR test forinfectioushypodermaiandhematopoieticnecrosisvirus ZHoU You’ YUEZhi—qin LIANG Cheng-zhu XU Biao2 ZHU Lai—hua GAO Hong-wei SUN M in U U Hong。 Ⅵ NG Dong-feng (OceanUniversityofChina，Qingdao266003) (ShandongEntry-exitInspectionandQuarantineBureauofP．R．China，Qingdao266002) (。ShenzhenEntry-exitInspectionandQuarantineBureauofP．R．China，518001) ABSTRACT Infectioushypodermaland hematopoieticnecrosisvirus(IHHNV)can infect culturedshrimpworldwideandcauseseriouseconomiclossestotheshrimpcultureindustry．84 Litopenaeusvannameisamplesfrom GuangxiProvinceweretestedwithreal—timequantitative 国家质量监督检验检疫总局项 目(20061K003)和山东省出入境检验检疫局科研项 目(SK200686)共同资助 通讯作者 。E—mail：liangcz@163．corn，Tel：(0532 收稿 日期：2007—04—16；接受 日期 ：20