教学中草履虫活体观察方法.pdfVIP

2010 NO O2 而 舀 nOvarionHerald 理 论 前 沿 教学中草履虫活体观察方法 杨仙玉 (浙江林学院林业与生物技术学院 浙江临安 311300) 摘 要：尾草履虫是动物学实验教学和生命科学研究的常用材料，常需对其进行活体观察。近年作者实验室提 出了体积定量法、脱纤毛 法等，弥补了传统方法的不足，简单、快速、观察效果好，大大提高了实验观察效率 ，基本解决 了观察活体革履虫难的问题。 关键词：革履虫活体观察 体积定量法 脱纤毛法 中图分类号：G642 文献标识码：A 文章编号：1673—9795(201o)o1(b)--0088-02 尾草履虫(Paramecium caudatum)是动物 主要有纤毛、口沟、大核、伸缩泡、收集管、 效观察时间短，难以从容地观察草履虫的内部 界原生动物门纤毛纲的代表动物，是国内外中 刺丝泡、食物泡；生理活动观察有食物泡的形 结构。 学、大学动物学实验教学 中的重要实验材 成过程及其在细胞内的移行途径和消化残渣 2．5压片法 料 ，同时由于它分布广泛、生长快速、易于 经胞肛排出体外的过程等。 用微吸管将虫体移至载玻片中央，吸去多 培养、在进化上有特殊地位，又是生命科学 余的水分，并在细胞周围的载玻片上点4处大 研究的良好材料 ，被用于探讨细胞衰老与分 2传统的活体草履虫观察方法及其局限 小均匀的软浆糊，加盖玻片，然后用镊子在4 化、信息传递、大小核的分工和核质关系等 性 点浆糊处均匀下压至虫体运动缓慢下来。此 领域的研究。但是 ，草履虫全身长满纤毛，游 活体草履虫观察方法等概括起来有 ：纤维 法的优点在于虫体不丢失、观察效果好 (图 动快速，在显微镜下观察细胞结构需采用一定 阻拦法、困扰法、吸水法、溶液处理法、压片 1A)、可进行后续的细胞核染色(图1c)。不足 的方法减缓或阻滞其运动。在多种动物学实 法、活体荧光染色法。 在于难度大 ，不适于在实验教学中推广。但 验教材及论文中对活体草履虫的观察方法都 2．1纤维阻拦法 是，对于专业人员来说，是其他方法所难以取 有描述 ，如纤维阻拦法、困扰法、吸水法、溶 将少许棉花纤维放在载玻片中央，加一滴 代的。 液处理法、压片法等，但每种方法各具其局限 草履虫培养液于棉花纤维之间，加上盖玻片 ， (Paramecium bursaria)接合后体。 性。为了寻找更适合于教学与研究用的观察 然后在镜下观察。此法的不足在于很难控制 Oma：老大核 ；箭头：新一代小核 ；无尾箭头：大 活体草履虫的方法，在参考前人研究成果和现 纤维的用量，使用量往往过多，视野中充满纤 核胚基(新一代的大核)。核周围的颗粒状结构 有方法的基础上，我们改进了溶液处理法中的 维 ，影响观察。即使虫体被限制在狭小的区域 为与绿草履虫共生的绿藻 A、B、c为同一 乙醇处理法，命名为 “脱纤毛法”，发明了 “体 内，虫体仍在原处旋转运动，达不到理想的观 个细胞，先进行明视野观察(A)，然后进行荧光 积定量法”，并对体积定量法进行了扩充。这 察效果。 显微镜观察(B)，最后进行石炭酸品红染色观察 些方法简单、快速、无干扰、成功率高，大大 2．2困扰法 (C)。标尺 =20urn。 提高了实验效率，使观察活体草履虫的方法得 取少量浆糊、胶水等困扰剂置于载玻片 2．6活体荧光染色法 到完善。本文对以往方法和新方法及其优缺 上，加一滴高密度的草履虫培养液 ，用解剖针 观察